[发明专利]一种细胞冻存液及其制备方法与应用有效
申请号: | 202110346080.6 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN113170778B | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 魏伟;嵐山芮;刘松 | 申请(专利权)人: | 广州瑞铂茵健康科技有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人: | 张泽锋 |
地址: | 510000 广东省广州市黄埔*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 细胞 冻存液 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种细胞冻存液,其特征在于,由甘露糖赤藓糖醇脂、海藻糖和磷酸盐缓冲液组成;
所述的细胞包括红细胞;
所述的细胞冻存液中,甘露糖赤藓糖醇脂的摩尔浓度为1~10 mol/L,海藻糖的摩尔浓度为0.25 mol/L;
所述的磷酸盐缓冲液的pH为7.4、摩尔浓度为0.01mol/L。
2.一种细胞冻存液的制备方法,其特征在于,通过将权利要求1所述细胞冻存液中的甘露糖赤藓糖醇脂、海藻糖混匀,然后再加入磷酸盐缓冲液搅拌混匀得到。
3.权利要求1所述的细胞冻存液在细胞冻存中的应用。
4.一种细胞冻存液的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)细胞冻存:将待冻存细胞加入到盛有权利要求1所述细胞冻存液的容器中,将上述盛有待冻存细胞和细胞冻存液的容器浸入液氮中,即可实现对细胞的保存;
其中,待冻存细胞与权利要求1所述细胞冻存液按体积比15~25 : 85~75计算;
(2)细胞解冻:将盛有待冻存细胞和细胞冻存液的容器从液氮中取出,水浴加热,直至细胞解冻复苏,得到解冻复苏后的细胞,然后加入生理盐水离心去上清,洗涤,将洗涤后的细胞用生理盐水配置成细胞盐水悬液,即得解冻去冻存液且复苏的红细胞。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中所述的水浴加热的条件为:37℃水浴加热0.5~1.5 min。
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