[发明专利]一种青蒿素含量快速检测方法

权利要求书

1.一种青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：确定最佳吸收波长；

S2：背景干扰的确定和消除；

S3：建立标准曲线；

S4：样品的处理及测定；

所述样品的处理及测定包括以下步骤：

S41：青蒿叶50℃烘干后粉碎过筛；

S42：取粉碎后的青蒿叶并加入95%乙醇进行水浴加热提取，对提取液进行离心；

S43：取离心后的上清液0.32mL加入95%乙醇1.28mL后再加入0.2%NaOH溶液6.40mL配制青蒿素样品溶液；

S44：将所述青蒿素样品溶液50℃水浴加热30min，快速冷却后加入弱酸性水稀释10倍得到待测样品；

S45：取步骤S43中的青蒿素样品溶液0.32mL，加入95％乙醇1.28mL，再加入6.4mL弱酸性水，摇匀，取0.8mL混合液，加入6.56mL弱酸性水，检测前加入0.2％NaOH 640ul摇匀作为参比溶液，20s内进行样品检测。

2.根据权利要求1所述的青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，步骤S1中确定所述最佳吸收波长的步骤包括：

S11：取青蒿素标准品0.1000g加95%乙醇配制成浓度为1.0 mg/mL的第一青蒿素母液；

S12：取第一青蒿素母液10mL加95%乙醇配制成浓度为0.1 mg/mL的第二青蒿素母液；

S13：取第二青蒿素母液0.0 mL，加入95%乙醇1.6 mL、弱酸性水6.4 mL，计为WA-1；取第二青蒿素母液0.0mL，加入95%乙醇1.6mL、0.2%NaOH溶液6.4mL，计为WA-2；取第二青蒿素母液0.4mL，加入95%乙醇1.2mL 、弱酸性水6.4 mL，计为WA-3；取第二青蒿素母液0.4mL，加入95%乙醇1.2mL、0.2％NaOH溶液6.4mL，计为WA-4；

S14：将WA-1、WA-2、WA-3、WA-4摇匀后50℃下水浴加热30min，快速冷却后以空气为参比在200～500nm进行光谱扫描确定最大吸收峰的波长位置。

3.根据权利要求2所述的青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，步骤S3中所述建立标准曲线的具体步骤包括：

分别取第二青蒿素母液0.0mL、0.1mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL至10mL的比色管中，分别加入95％乙醇2mL、1.9mL、1.8mL、1.5mL、1.0mL、0.5mL、0.0mL，再分别加入0.2％NaOH 8mL，配成浓度分别为0.00 mg/mL、0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.15mg/mL、0.20mg/mL的标准溶液，50℃水浴加热30min，快速冷却，以空气为参比测吸光度值后再以0.00mg/mL标准液为参比作背景扣除，建立标准曲线。

4.根据权利要求1所述的青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，步骤S2中所述背景干扰的确定和消除的步骤包括：

S21:取步骤S42中离心后的提取液0.4mL加入95%乙醇1.2mL，再加入弱酸性水6.4mL；

S22:取步骤S42中的提取液0.4mL加入95%乙醇1.2mL，再加入0.2％NaOH 6.4mL摇匀后于50℃下水浴加热30min后快速冷却；

S23：将步骤S21和步骤S22中处理后的提取液均稀释10倍，以空气为参比测样品的吸光度；

S24:分别取2个青蒿含量差异较大的青蒿样品乙醇提取液40ul，加入95%乙醇160ul，再加入弱酸性纯水9mL，最后加入0.2％NaOH 800ul，测样品的吸光度值；

对比步骤S23和S24样品测定过程中背景干扰的变化，确定最佳的参比液。

5.根据权利要求1所述的青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，所述弱酸性水的pH值为6.0≤pH≤7.0。

6.根据权利要求1-5任一所述的青蒿素含量快速检测方法，其特征在于，所述青蒿素标准品、95%乙醇和氢氧化钠均为分析纯。