[发明专利]一种广谱抗病毒的重组沙门氏菌的构建方法

权利要求书

1.一种广谱抗病毒的重组沙门氏菌的构建方法，其特征是，包括以下步骤：

步骤1）、以单核李斯特杆菌NH1株的全基因序列为模板，设计合成不含“ACA”碱基序列的dacA碱基片段：ATGGACTTTTCCAATATGAGTATCCTTCACTATTTAGCGAATATTGTAGATATTTTGGTGGTTTGGTTCGTAATTTATAAGGTTATCATGCTTATCCGCGGCACGAAAGCCGTCCAGCTGTTGAAGGGGATTTTCATTATTATTGCCGTCAAGTTACTTAGCGGCTTCTTCGGATTGCAGACGGTGGAATGGATTACTGATCAAATGCTGACTTGGGGTTTCTTAGCCATTATCATTATCTTTCAACCGGAATTGCGTCGTGCCCTGGAGACTTTGGGGCGTGGCAATATCTTTACCCGCTATGGATCACGCATTGAGCGTGAGCAGCACCACCTTATTGAGTCTATTGAAAAGTCCACGCAATATATGGCGAAGCGTCGCATTGGAGCTTTGATCTCTGTGGCTCGTGATACCGGCATGGACGACTATATCGAGACTGGCATTCCGCTTAATGCGAAAATCTCATCGCAATTATTGATTAATATCTTCATCCCCAATACCCCTCTTCACGATGGCGCAGTGATCATTAAAGGTAACGAGATCGCGAGCGCTGCCAGTTATCTGCCATTGTCCGACTCGCCGTTTCTTTCTAAGGAGCTGGGAACTCGCCATCGTGCCGCATTAGGGATTTCCGAGGTGACCGATTCAATCACCATCGTTGTCAGCGAGGAAACGGGTGGGATTTCCCTTACGAAGGGAGGCGAACTGTTCCGTGATGTATCCGAAGAAGAATTGCATAAGATTTTGCTTAAAGAGCTGGTGACTGTCACGGCTAAAAAACCAAGCATTTTCTCCAAATGGAAAGGAGGTAAGTCCGAGTGA，该片段长度为822bp；

步骤2）、将dacA碱基片段与pYA3493质粒同时经EcoR I和HindⅢ双酶切，并将酶切产物经T4连接酶连接后转化rSC0002感受态细胞，形成重组表达质粒pS-DacA；

步骤3）、利用化学转化法将重组pS-DacA质粒引入猪霍乱沙门氏菌裂解载体菌株rSC0120中，构建广谱抗病毒的重组猪霍乱沙门氏菌裂解载体rSC0120株。