[发明专利]一种同时检测多种鞘磷脂代谢物的方法在审
申请号: | 202110259675.8 | 申请日: | 2021-03-10 |
公开(公告)号: | CN115078554A | 公开(公告)日: | 2022-09-20 |
发明(设计)人: | 陆优丽;杨双双;张美微;于凡;梁艳;忻亮;李小英;夏朴 | 申请(专利权)人: | 上海市徐汇区中心医院 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72 |
代理公司: | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人: | 沈其梅 |
地址: | 200031 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 多种 磷脂 代谢物 方法 | ||
1.一种同时检测多种鞘磷脂代谢物的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)取血清样品,加入检测鞘氨醇、二氢鞘氨醇及S1P、dhS1P对应的同位素内标以及沉淀剂,进行蛋白沉淀后,离心取上清;
(2)在步骤(1)获得的上清中加入稀释液稀释后进行LC-MS/MS分析,测定四种鞘磷脂代谢物的含量。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中沉淀剂为纯甲醇、纯乙醇、纯乙腈、纯丙酮或二个以上的混合溶液。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中同位素内标为C17-Sph和S1P-d7。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中沉淀剂为纯甲醇。
5.如权利要求2或4所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中液相色谱梯度洗脱条件为:室温,流动相参数如下:
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中质谱检测采用电喷雾离子源ESI电离,正离子扫描。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中样品与沉淀剂的体积比为1:3-10。
8.如权利要求6或7所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中样品与沉淀剂的体积比为1:4-7。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中样品与沉淀剂的体积比为1:4。
10.如权利要求6、7或9所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中沉淀剂为分析纯甲醇。
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