[发明专利]一种鹅不食草指纹图谱及其构建方法

权利要求书

1.一种鹅不食草指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤，

(1)鹅不食草供试品溶液的制备：采用溶剂提取鹅不食草供试品，过滤，取滤液，所述溶剂选自水或者体积百分数为30-70％的甲醇水溶液；对照品溶液的制备：分别称取新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、山金车内酯C、山金车内酯D、小堆心菊素C、短叶老鹳草素A对照品适量，精密称定，分别置于不同棕色量瓶中，加甲醇制成每1ml含新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、山金车内酯C、山金车内酯D、小堆心菊素C、短叶老鹳草素A各50μg的溶液，即得；

(2)取鹅不食草供试品溶液和对照品溶液采用液相色谱法检测，采用AQ-C18色谱柱，柱温为20℃，流速为1.0mL/min，以0.02％磷酸水溶液为流动相B，以乙腈为流动相A进行梯度洗脱，所述梯度洗脱程序包括：0-35min，A：B的体积百分数为6％→11.7％：94％→88.3％；35-37min，A：B的体积百分数为11.7％→13％：88.3％→87％；37-47min，A：B的体积百分数为13％→14.7％：87％→85.3％；47-52min，A：B的体积百分数为14.7％→16.5％：85.3％→83.5％；52-54min，A：B的体积百分数为16.5％→19.5％：83.5％→80.5％；54-63min，A：B的体积百分数为19.5％→19.7％：80.5％→80.3％；63-90min，A：B的体积百分数为19.7％→20.7％：80.3％→79.3％；90-123min，A：B的体积百分数为20.7％→21.9％：79.3％→78.1％；123-127min，A：B的体积百分数为21.9％→43％：78.1％→57％；127-152min，A：B的体积百分数为43％→50％：57％→50％；152-153min，A：B的体积百分数为50％→6％：50％→94％；153-155min，A：B的体积百分数为6％：94％，洗脱时间120min，检测波长为325nm，洗脱时间≥120min时，检测波长为225nm；得到鹅不食草指纹图谱和对照品指纹图谱，峰1为新绿原酸、峰2为绿原酸、峰3为咖啡酸、峰6为芦丁、峰7为异绿原酸B、峰8为异绿原酸A、峰10为异绿原酸C、峰11为山金车内酯D、峰12为山金车内酯C、峰13为小堆心菊素C、峰14为短叶老鹳草素A。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述提取方式选自回流提取或者超声提取；提取时溶剂的用量是鹅不食草供试品的10-50倍量；提取时间为15-60分钟。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法还包括采用鹅不食草对照药材作为参照物按照权利要求1或2所述的构建方法制备参照物溶液并采用液相色谱法检测参照物溶液得到参照物指纹图谱的步骤。

4.权利要求1-3中任一项所述的鹅不食草指纹图谱的构建方法在鹅不食草产品的质量检测和/或鉴别中的用途。