[发明专利]一种头孢菌素类化合物生产菌株及其应用

权利要求书

1.一种顶头孢霉菌（Cephalosporium acremonium）D-G3-B-2001，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC ，保藏编号为CGMCC NO:20270。

2.一种真菌培养物，其特征在于，其含有权利要求1所述的顶头孢霉菌D-G3-B-2001。

3.根据权利要求2的真菌培养物，其特征在于，所述培养物为生物学纯的培养物。

4.根据权利要求2或3的真菌培养物，其特征在于，所述培养物由顶头孢霉菌菌株D-G3-B-2001培养获得。

5.权利要求1所述的顶头孢霉菌D-G3-B-2001在发酵生产头孢菌素类化合物中的用途;所述头孢菌素类化合物为头孢菌素C（CPC）、DCPC、DAOC中的一种或多种。

6.一种生产DAOC的方法，包括如下步骤：

（A）采用权利要求1所述的顶头孢霉菌（Cephalosporium acremonium）D-G3-B-2001菌株发酵，得发酵液；

（B） 从发酵液中分离得到含有DAOC的滤液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤（A）所述的发酵方法为：将D-G3-B-2001菌株孢子进行斜面培养，斜面培养获得的孢子悬浮液经多级种子罐培养，然后接入发酵罐中发酵。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述多级种子罐培养为一级种子罐培养，或两级、三级或更多级种子罐连续培养。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述种子罐培养为三级培养。

10.根据权利要求7所述的方法，其中菌株的培养和发酵温度为20-30℃。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述菌株的培养和发酵温度为28-30℃。

12.根据权利要求6-11任一所述的方法，其中步骤（A）所述的发酵步骤包括：

(1) 种子液培养：①母斜面孢子制备：将冷冻保存在砂土管或甘油管中的顶头孢霉菌孢子，接种于灭菌的斜面培养基上，在温度28-34℃条件下，培养7-9 天；②子斜面孢子制备：将母斜面孢子，接种于灭菌的斜面培养基上，在温度28-34℃条件下，培养7-9 天；③种子培养：将子斜面孢子，接种于灭菌的液体种子培养基中，经过三级种子扩大培养，得到种子液；

(2) 发酵：将种子液按15- 40％体积比接种于灭菌的培养基中，通入无菌空气并开启搅拌，添加营养物质，在温度25-30℃条件下，培养5-8天，得发酵液。

13.一种生产7-ADAC的方法，包括以下步骤：

（1’）从权利要求6-12任一项所述方法制备的发酵液中分离得到含有DAOC的滤液；（2’）通过对DAOC进行处理制备得7-ADCA。

14.根据权利要求13的方法，其特征在于，所述方法包括：将含有DAOC的发酵液通过陶瓷膜过滤，菌渣经环保处理，滤液经过超滤过滤，纳滤膜进行浓缩得到浓缩液，将浓缩液吸附，解析，脱色，酶解，结晶得到7-ADAC产品。