[发明专利]伊特卡肽的液相合成方法

说明书

本发明提供了一种伊特卡肽的液相合成方法。该合成方法包括：采用Cbz作为保护基团液相顺序合成式（I）序列，脱除式（I）序列中Ac‑D‑Cys(K)的侧链保护基团K，得到式（II）序列；通过Boc‑L‑Cys(S‑S‑Py)‑OtBu在式（II）序列的D‑Cys处形成二硫键获得式（III）序列，脱除式（III）序列中的保护基，得到伊特卡肽；K为Mmt或Trt。Cbz保护基既易于控制纯度，避免缺失肽，又可经Pd/C加氢简单脱保护；采用Boc‑L‑Cys(S‑S‑Py)‑OtBu与肽链连接，便于精准控制二硫键的合成，提高了目标多肽的收率和纯度。

技术领域

本发明涉及多肽合成领域，具体而言，涉及一种伊特卡肽的液相合成方法。

背景技术

伊特卡肽(Etelcalcetide)是由KaiPharmaceuticals，Inc.开发的一种新颖的拟钙剂(calcimimetic agent)，能够抑制甲状旁腺激素的分泌。伊特卡肽可结合并激活甲状旁腺上的钙敏感受体，实现甲状旁腺激素水平的降低。

伊特卡肽有3个D构型的精氨酸、2个D构型的丙氨酸、1个D构型的精氨酰胺、1个L构型半胱氨酸与1个D构型半胱氨酸(N段被乙酰基封闭)构成，其中D构型半胱氨酸与L构型半胱氨酸以二硫键连接在一起(N-acetyl-D-cysteinyl-D-alanyl-D-arginyl-D-arginyl-D-ar ginyl-D-alanyl -D-Arg ininamide， disulfid ewith-L-cysteine)，其结构式I所示：

目前报道Etelcalcetide 的合成工艺有以下专利：WO 2011/014707，US 2017/0190739 A1， WO 2017/114240 A1，US 2019/0100554 A1，WO 2017/114238 A1，CN109734778 A，CN 109280078 A 等等。Etelcalcetide 的合成方法有液相合成和固相方法，通过制备纯化后的伊特卡肽纯品。

固相专利方法：

专利WO 2017/114240 A1：首先固相方法合成全保护的7肽，使用二硫二吡啶活化7肽构建二硫键，同Boc-L-Cys-OH偶联得到伊特卡肽。切割树脂后，制备纯化后得到最终产品，纯度98.5%。使用活性比较高的Boc-L-Cys-OH偶联得到粗肽纯度为81.0%，杂质较多，需多次纯化，使用溶剂较多，成本高。

专利US 2019/0100554 A1：首先固相方法合成全保护的N末端乙酰化的7肽，脱除Mmt后，同Boc-L-Cys（Npys）-OH偶联得到伊特卡肽。粗肽纯度较低，需要多次纯化，收率有待提高。

可见，目前固相合成方法，均存在粗肽纯度低，二硫键错接，杂质多，难纯化等问题。

液相专利方法：