[发明专利]硅基罗丹明荧光染色试剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种硅基罗丹明荧光染色试剂，其特征在于，具有式(Ⅰ)、(Ⅱ)或(Ⅲ)所示结构：

其中，R₁为C1-C10烷基链。

2.根据权利要求1所述的硅基罗丹明荧光染色试剂，其特征在于，所述罗丹明荧光染色试剂为：

3.一种制备权利要求1所述的具有式(Ⅰ)的硅基罗丹明荧光染色试剂的方法，其特征在于，其包括以下步骤：

(1.1)将间溴苯胺和1，4-二溴丁烷溶于第一有机溶剂中并加入第一弱碱加热搅拌，反应得到中间体A1；

(1.2)在惰性气氛下将所述中间体A1加入至三氯氧磷和DMF的混合溶液中搅拌，然后加入水淬灭反应，得到的反应液用二氯甲烷或乙酸乙酯萃取，得到中间体A2；

(1.3)将所述中间体A2和第一还原剂加入至第二有机溶剂中搅拌，然后加入水淬灭反应，得到的反应液用二氯甲烷或乙酸乙酯萃取，得到中间体A3；

(1.4)将所述中间体A1和所述中间体A3加入至第三有机溶剂，加入三氟化硼乙醚搅拌，反应得到中间体A4；

(1.5)将所述中间体A4溶于第四有机溶剂并将溶液冷却至0℃以下，加入强碱，在搅拌下加入二氯二甲基硅烷，随后加入水淬灭反应，得到的反应液用二氯甲烷或乙酸乙酯萃取，得到中间体A5；

(1.6)将所述中间体A5溶于第五有机溶剂中，在搅拌下加入高锰酸钾继续搅拌，反应得到中间体A6；

(1.7)将所述中间体A6溶于第六有机溶剂中，在搅拌下加入第二弱碱，再加入三氟甲磺酸酐，在搅拌下加入制得具有式(Ⅰ)的硅基罗丹明荧光染色试剂；其中，R₁为C1-C10烷基链。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，

步骤(1.1)中：搅拌时间为10-14h；所述第一有机溶剂为DMSO和DMF中的一种或两种组合，所述第一弱碱为碳酸钠、碳酸钾、磷酸钾和磷酸钠中的一种或多种组合；

步骤(1.2)中：在0℃充分搅拌后升温至60-80℃并搅拌过夜；

步骤(1.3)中：在室温下搅拌6-10h；所述第一还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾和氢化铝锂中的一种或多种组合，所述第二有机溶剂为甲醇、乙醇、二氧六环和四氢呋喃中的一种或多种组合；

步骤(1.4)中：在室温下搅拌5-7h；所述第三有机溶剂为二氯甲烷和三氯甲烷中的一种或两种组合；

步骤(1.5)中：将所述溶液进一步冷却至-70～-80℃，搅拌时间为45-80min；所述第四有机溶剂为四氢呋喃和乙醚中的一种或两种组合，所述强碱为正丁基锂、仲丁基锂或叔丁基锂；

步骤(1.6)中：加入高锰酸钾之前，将体系温度冷却至0℃，然后加入高锰酸钾搅拌5-7h；所述第五有机溶剂为丙酮和乙腈中的一种或两种组合；

步骤(1.7)中：加入三氟甲磺酸酐之前，将体系温度冷却至0℃，然后加入三氟甲磺酸酐搅拌45-80min，加入后在室温下搅拌5-7h；所述第六有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、乙腈和DMF中的一种或多种组合，所述第二弱碱为吡啶、三乙胺和4-二甲氨基吡啶中的一种或多种组合。