[发明专利]一种产衣康酸的重组土曲霉菌株及其构建方法与应用有效
| 申请号： | 202010783221.6 | 申请日： | 2020-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN111944706B | 公开（公告）日： | 2022-06-03 |
| 发明（设计）人： | 吕雪峰;柴小高;黄雪年;周昌;王敏;刘璐;谢义生;周凯华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所;浙江国光生化股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N1/15 | 分类号： | C12N1/15;C12N15/80;C12P7/44;C12R1/66 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 王志新 |
| 地址： | 266101 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 产衣康酸 重组 曲霉 菌株 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述重组土曲霉菌株是在出发菌株中过表达玉蜀黍黑粉菌的反式乌头酸脱羧酶而获得的；所述出发菌株为土曲霉(Aspergillus terreus)；所述反式乌头酸脱羧酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码所述反式乌头酸脱羧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；所述重组土曲霉菌株中含有反式乌头酸脱羧酶的表达盒，所述表达盒由构巢曲霉三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PgpdAt、反式乌头酸脱羧酶基因和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC组成；所述反式乌头酸脱羧酶的表达盒核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。
2.根据权利要求1所述产衣康酸的重组土曲霉菌株，其特征在于，所述出发菌株为土曲霉CICC40205、土曲霉NRRL1960、土曲霉DSM23081、土曲霉TN484或土曲霉TN484-M1。
3.一种权利要求1或2任意一项所述产衣康酸的重组土曲霉菌株的构建方法，其特征在于，是在土曲霉菌株中导入编码所述反式乌头酸脱羧酶的基因构建重组土曲霉菌株。
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，步骤如下：
1)反式乌头酸脱羧酶表达盒的制备：将反式乌头酸脱羧酶tad1基因针对土曲霉表达进行密码子优化，优化后的反式乌头酸脱羧酶tad1基因的5’端与构巢曲霉三磷酸甘油醛脱氢酶基因启动子PgpdAt相连，3’端与构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC相连，连接后获得反式乌头酸脱羧酶表达盒；
2)转化：将所述反式乌头酸脱羧酶表达盒导入土曲霉，获得重组土曲霉菌株。
5.权利要求1或2任意一项所述产衣康酸的重组土曲霉菌株在制备衣康酸中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述应用是指将所述重组土曲霉菌株培养于液体发酵培养基经发酵生产衣康酸。
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