[发明专利]超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法

权利要求书

1.超高效液相色谱串联质谱技术同时检测血清中抗抑郁药物的方法，其特征在于，血清样本通过预处理后取上清进样，先利用超高效液相色谱将抗抑郁药物与血清基质分离，再利用质谱同位素内标定量法，以标准品与内标物的浓度比为X轴，标准品与内标物的峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算抗抑郁药物的含量；具体色谱条件为：

(1)高效液相色谱条件：

流动相A：含0.001％～0.1％甲酸水溶液；

流动相B：含0.001％～0.1％甲酸甲醇溶液；

色谱柱：Phenomenex Kintex C18(2.1×100mm，2.6μm)；

采用流动相A和流动相B为混合流动相进行梯度洗脱，所述梯度洗脱过程如下：在0-2.0分钟内，流动相A和流动相B的体积比由85:15匀速渐变至25:75；在2.0-2.5分钟内，流动相A和流动相B的体积比由25:75匀速渐变至3:97；在2.5-4.5分钟内，流动相A和流动相B的体积比由3:97匀速渐变至85:15；流速为0.2～0.5mL/min，每个样品采集时间为4.5min，柱温为30～50℃，进样体积为0.2～10μL；

(2)质谱条件：

在电喷雾电离检测模式下，采用多反应监测的质谱扫描模式；喷雾电压为3.0kV(ESI+)；去溶剂温度为120℃；雾化气温度为400℃，雾化气流速为800L/h，锥孔气流速为150L/h；同时监测各目标物以及同位素内标；

所述的抗抑郁药物选自BPP、AML、HBPP、NTP、NVLF、MAS、MTZ、VLF、ATP、DXP、NFXT、DLX、FXT、FVX、CTP、PXT、TZD、VXT中的一种或多种。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法，其特征在于，所述的血清为人或动物的血清。

3.根据权利要求1所述的高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法，其特征在于，所述流动相A为0.005％-0.05％甲酸水溶液，优选为0.01％甲酸水溶液；所述流动相B为0.005％-0.05％甲酸甲醇溶液，优选为0.01％甲酸甲醇溶液；所述流速为0.4mL/min；所述柱温为45℃；所述进样体积为1μL。

4.根据权利要求1所述的超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法，其特征在于，血清样本的预处理方法为：将血清样本经蛋白沉淀后，振荡、离心取上清。

5.根据权利要求4所述的高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法，其特征在于，所述的蛋白沉淀采用的蛋白沉淀剂为甲醇、乙腈中的任意一种,或甲醇和乙腈的混合溶剂，优选为甲醇和乙腈体积比1:2的混合溶剂。

6.根据权利要求5所述的高效液相色谱串联质谱技术检测血清中抗抑郁药物浓度的方法，其特征在于，所述的血清样本的预处理方法为：取50μL血清于1.5mL离心管中，向其中加入20μL混合内标工作液，然后涡旋数秒后振荡5s；加入430μL所述的蛋白沉淀剂，高速振荡5min；14000r/min，4℃离心5min；转移EP管中的上清液60μL至塑料内衬管中待进样。