[发明专利]脂肪细胞肽BMP-2C在制备丰乳精华中的应用

权利要求书

1.脂肪细胞肽BMP-2C在制备丰乳精华中的应用，其特征在于，所述脂肪细胞肽BMP-2C在丰乳精华中的质量浓度为0.01％～0.1％。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述丰乳精华由如下质量浓度的组分组成，茴香提取物0.1％～1％，葛根提取物0.1％～0.5％，玻璃苣提取物0.05％～0.5％，月见草提取物0.02％～0.5％，寡肽-10.01％～0.1％，可溶性胶原0.1％～1％，乙酰六肽-30.001％～0.01％，脂肪细胞肽BMP-2C 0.01％～0.1％，甘油1％～5％，玫瑰花提取物0.01％～0.5％，透明质酸钠0.1％～1％，辛酰羟肟酸0.1％～0.3％，苯氧乙醇0.1％～0.4％，余量为去离子水。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述丰乳精华由如下质量浓度的组分组成，茴香提取物0.5％，葛根提取物0.3％，玻璃苣提取物0.25％，月见草提取物0.3％，寡肽-10.05％，可溶性胶原0.5％，乙酰六肽-30.005％，脂肪细胞肽BMP-2C 0.05％，甘油3％，玫瑰花提取物0.1％，透明质酸钠0.1％，辛酰羟肟酸0.1％，苯氧乙醇0.1％，余量为去离子水。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述丰乳精华由如下质量浓度的组分组成，茴香提取物0.8％，葛根提取物0.4％，玻璃苣提取物0.3％，月见草提取物0.3％，寡肽-10.07％，可溶性胶原0.2％，乙酰六肽-30.003％，脂肪细胞肽BMP-2C 0.08％，甘油3％，玫瑰花提取物0.2％，透明质酸钠0.3％，辛酰羟肟酸0.1％，苯氧乙醇0.1％，余量为去离子水。

5.如权利要求1～4任一所述的应用，其特征在于，所述脂肪细胞肽BMP-2C的制备方法如下：

(1)脂肪细胞肽BMP-2C基因序列优化：

脂肪细胞肽BMP-2C基因序列如SEQ ID NO.1所示；

结合大肠杆菌密码子使用频率，利用JCat密码子优化工具对脂肪细胞肽BMP-2C基因序列进行了密码子优化，同时通过PCR在脂肪细胞肽BMP-2C基因序列的5’端添加6×HIS标签序列，通过重叠PCR在3’端增加来源于酿酒酵母的分子伴侣蛋白PDI，优化后脂肪细胞肽BMP-2C基因序列如SEQ ID NO.2所示；

(2)构建表达载体pET-30a-BMP-2C：

全基因合成优化后脂肪细胞肽BMP-2C基因，通过PCR扩增pET-30a质粒骨架及优化后脂肪细胞肽BMP-2CBMP-2C基因，核酸电泳后切胶回收，利用Gibson重组法构建表达载体pET-30a-BMP-2C。

(3)表达载体pET-30a-BMP-2C导入大肠杆菌构建表达工程菌：

(4)发酵表达工程菌，诱导表达；

(5)对表达产物利用镍柱层析方法进行分离和纯化，即得到脂肪细胞肽BMP-2C。

6.如权利要求2～5任一所述的应用，其特征在于，所述丰乳精华的制备工艺如下：

(1)将去离子水加入配料罐进行灭菌处理；

(2)加入茴香提取物、葛根提取物、玻璃苣提取物、月见草提取物、甘油、玫瑰花提取物、透明质酸钠，边搅拌边均质，搅拌速度为2000～3000rpm/min，均质压力为0.02～0.08MPA，至分散均匀，得预混料1；

(3)将预混料1温度降至30℃，之后加入寡肽-1、可溶性胶原、乙酰六肽-3：、脂肪细胞肽BMP-2C，边搅拌边均质，搅拌速度为2000～3000rpm/min，均质压力为0.02～0.08MPA，至分散均匀，得预混料2；

(4)向预混料2中加入辛酰羟肟酸，苯氧乙醇，边搅拌边均质，搅拌速度为2000～3000rpm/min，均质压力为0.02～0.08MPA，至分散均匀，之后调PH至6.5即得成品。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，步骤(1)中灭菌条件为灭菌温度85℃，灭菌时间30min。