[发明专利]石菖蒲糖聚合物及其制备方法和应用有效
申请号: | 202010110367.4 | 申请日: | 2020-02-21 |
公开(公告)号: | CN111393534B | 公开(公告)日: | 2022-04-22 |
发明(设计)人: | 严春艳;钟晶;丘娴 | 申请(专利权)人: | 广东药科大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P25/28;A61K36/888 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 林德强 |
地址: | 510240 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 石菖蒲 聚合物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种石菖蒲糖聚合物,包括AT1-3和/或AT2-2,其中,AT1-3是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和木糖组成的糖聚物,其结构式如式(I)所示:
其中,a、b、c、d、e、f的范围为1~1000;
AT2-2是由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖,木糖和岩藻糖组成的糖聚物,其结构式如式(Ⅱ)所示:
其中,a、b、c的范围为1~1000。
2.权利要求1所述石菖蒲糖聚合物在制备预防和/或治疗神经退行性疾病及其并发症的药物中的应用。
3.权利要求1或2所述石菖蒲糖聚合物的制备方法,包括以下步骤:
S1.浸泡:取石菖蒲干燥根茎,切段,浸泡,得浸泡液A;
S2.水提:将石菖蒲根茎和浸泡液A进行加热提取,过滤,得提取液B和残渣C;
S3.分级醇沉:将提取液B减压浓缩后,加入乙醇使乙醇体积浓度为a%,静置,收集沉淀和上清液,得粗糖聚合物AT1和上清液D;将上清液D再次浓缩,加入乙醇使乙醇体积浓度为b%,静置,收集沉淀和上清液,得粗糖聚合物AT2和上清液E;将上清液E再次浓缩,加入乙醇使乙醇体积浓度为c%,静置,收集沉淀,得粗糖聚合物AT3,其中10≤a<60,60≤b<80,80≤c<100;
S4.碱提:将步骤S2中残渣C浸泡于NaOH溶液中,静置,收集上清液,得上清液F,加入HCl溶液中和,离心收集上清液,浓缩得上清液G,加入乙醇使乙醇体积浓度为30~90%,静置,收集沉淀,得碱提粗糖聚合物ATB;
S5.纯化:对粗糖聚合物AT1、AT2、AT3、ATB分别进行纯化,得纯化石菖蒲粗糖聚合物AT1、AT2、AT3、ATB;
S6.离子交换柱层析:将步骤S5中得到的纯化粗糖聚合物AT1、AT2分别进行离子交换柱层析,用0~2M浓度的NaCl溶液进行梯度洗脱,使用苯酚-硫酸法跟踪洗脱曲线,根据洗脱曲线分别收集糖部分,然后浓缩、透析、冷冻干燥,再分别用水进行溶解,离心分离后分别得到上清液H、上清液I;
S7.分子筛凝胶柱层析:将步骤S6中上清液H、上清液I分别进行分子筛凝胶柱层析,用水进行洗脱,使用苯酚-硫酸法跟踪洗脱曲线,根据洗脱曲线收集糖部分,浓缩、冷冻干燥后获得权利要求1中所述石菖蒲糖聚合物AT1-3、AT2-2。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S3中醇沉后静置的时间为10~28h。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S5中纯化的具体操作为:利用Sevag法分别对粗糖聚合物AT1、AT2、AT3、ATB进行除蛋白,除蛋白后再经透析袋进行透析、冻干,透析袋的截留分子量为1000Da。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S6中离子交换柱为离子交换纤维素或离子交换凝胶,透析袋的截留分子量为100Da。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S7中分子筛凝胶层析选用Sephadex G或Sephacryl S系列分子筛色谱柱。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S2中水提的具体操作为:用5~15倍体积的60~100℃的热水对石菖蒲根茎提取1~10h。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤S3、S4、S6、S7中浓缩为40~70℃减压浓缩。
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