[发明专利]一种用于壮骨的橙皮素衍生物的制备

说明书

本发明提供了一种用于壮骨的橙皮素衍生物的制备和应用，属于生物医药领域；本发明的橙皮素衍生物是在橙皮素的母环上连接异戊二烯基基团，然后用生物酶连接糖基基团，可以制备出高纯度、高生物利用度的橙皮素衍生物；本发明的橙皮素衍生物具有溶解度高，生物活性强的特点；在控制和治疗骨质疏松症、促进血液循环方面效果也优于橙皮素。

技术领域

本发明涉及一种用于壮骨的橙皮素衍生物的制备，属于生物医药领域。

技术背景

骨质疏松症是以骨组织显微结构受损，骨矿成分和骨基质等比例地不断减少，骨质变薄，骨小梁数量减少，骨脆性增加和骨折危险度升高的一种全身骨代谢障碍的疾病。当体内激素水平下降，骨质吸收增加，骨形成减少所致。因此，目前并没有一套治疗骨质疏松症状的有效方案。

柑橘中的橙皮苷具有抗癌作用、治疗骨质疏松、抗氧化、促进血液循环、改善心脑血管循环及改善睡眠等功效，具有很高的经济和药用价值。因橙皮苷在水中和缓冲溶液中的溶解度低，使橙皮苷的生物利用度低，效果不明显。

异戊二烯基在生物合成中具有重要的作用。异戊烯基侧链的存在增加了黄酮类化合物的亲脂性和生物导向性，使其在生物体内更易透过细胞膜到达作用目标，大大提高了黄酮类化合物的药用价值。

发明内容

本发明通过在橙皮素上添加异戊二烯基基团，解决异戊二烯基在黄酮化合物中应用较少的问题，增加橙皮素黄酮化合物的预防和治疗骨质疏松症和促进血液循环方面的功效。但其单体难溶于水，作为药物直接使用时，在人体内的生物利用度低，难以充分发挥药物疗效。因此对橙皮素进行修饰，如：将橙皮素进行糖基化，提高橙皮素的溶解度和生物利用度。

本发明再通过异戊二烯基橙皮素进行糖基化转化，得到高纯度、高质量、高生物活性的橙皮素衍生物。橙皮素衍生物的溶解度比橙皮素、橙皮苷提高300倍以上，可以广泛的应用在食品、医药等领域中，使橙皮素的应用范围扩大。

本发明的橙皮素衍生物(Ⅰ)的步骤为：

1)将2g橙皮素，2～2.4倍当量的醋酸酐，2～4倍的哌啶，于100～140℃反应2～12h，产物为Ⅱa，收率为90～93％；

2)将Ⅱa 2g和1～5倍的苯硫酚，0.1～1倍的咪唑，以N～甲基吡咯烷酮为溶剂，在0℃，反应5～15h，产物为Ⅱb，收率为86～88％；

3)将Ⅱb和1～5倍的(2-甲基丁-3-烯-2-基)碳酸异丁酯，三苯基膦为催化剂，THF溶液中，-20～0℃反应12h得到Ⅱc，收率为81～84％；

4)将Ⅱc 2g加入2倍当量的醋酸酐和8倍的醋酸铵，甲醇中回流20h得到产物Ⅱd，收率为90～95％。

5)用生物酶处理Ⅱd制备橙皮素衍生物(Ⅰ)：

其中：n＝1～5；R₁、R₂＝OH、OCH₃、OCH₂CH₃；R₃＝Glu；R₄、R₅

本发明的橙皮素衍生物和成步骤方程式为：

其中：n＝1～5；R₁、R₂＝OH、OCH₃、OCH₂CH₃；R₃＝Glu。

本发明的酶法包括：葡萄糖基转移酶和鼠李糖基转移酶中的一种或组合；添加的糖基为葡萄糖，UDP-葡萄糖，鼠李糖，UDP-鼠李糖。