[发明专利]α-L-岩藻糖苷酶测定试剂

说明书

本发明公开了一种α‑L‑岩藻糖苷酶测定试剂，所述α‑L‑岩藻糖苷酶测定试剂包括80～200mmol/L缓冲液、5～10g/L氯化钠、0.1～1g/L色源‑岩藻糖苷底物、0.5～2g/L稳定剂、0.1～2g/L激活剂、0.5～5g/L非离子型表面活性剂和2～5g/L金属络合剂，通过加入所述稳定剂解决色源‑岩藻糖苷底物水解反应导致试剂空白显著上升的问题，采用GOOD’S生物缓冲液和所述激活剂提高稳定性和灵敏度。

技术领域

本发明涉及医学检测技术领域，尤其涉及一种α-L-岩藻糖苷酶测定试剂。

背景技术

α-L-岩藻糖苷酶(a-L-Fucosidase，AFU)是一种溶酶体酸性水解酶，分类名为a-L-岩藻糖苷酶岩藻糖水解酶(EC32.1.51)。AFU其基本生理功能是催化含岩藻糖基的各种糖脂、粘多糖、糖蛋白和糖苷等大分子物质的分解代谢，广泛分布于人体内的各种组织、细胞及体液中，多项研究证实AFU是一项新的诊断原发性肝癌的肿瘤标志物，随着对AFU的进一步深入研究，检测方法也不断发展。 AFU的主要检测方法有荧光法、化学比色法、连续监测法等。荧光法的底物为 4-甲基伞形酮α-L-岩藻吡喃糖苷，方法灵敏度高，但需要专门的仪器，不能常规应用。比色法常用的底物是对硝基酚α-L-岩藻吡喃糖苷(PNP-F)，适用于手工法测定，因需要设定血清空白管已排除胆红素引起的干扰，难以实现自动分析。随着AFU检测方法学的不断发展与进步，连续监测法是最近应用最普遍的检测方法，它以对硝基苯岩藻糖苷为底物，经样本中AFU催化水解，产生对硝基酚(CNP)，在405nm或410nm波长下监测CNP的生成速率，可计算出样本中AFU的活性。连续监测法具有测试快速、操作方便的特点，以此为基础的α-L-岩藻糖苷酶测定试剂盒已逐步在临床检验中得到普及应用，但试剂盒普遍存在灵敏度不够、底物不稳定，特别是试剂空白吸光度显著上升的缺陷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种α-L-岩藻糖苷酶测定试剂，灵敏度高、稳定性好，并且试剂空白低。

为实现上述目的，本发明提供了一种α-L-岩藻糖苷酶测定试剂，所述α-L- 岩藻糖苷酶测定试剂包括80～200mmol/L缓冲液、5～10g/L氯化钠、0.1～1g/L 色源-岩藻糖苷底物、0.5～2g/L稳定剂、0.1～2g/L激活剂、0.5～5g/L非离子型表面活性剂和2～5g/L金属络合剂。

其中，所述缓冲液为PH值在4.0～7.0之间的GOOD’S生物缓冲液，所述 GOOD’S生物缓冲液包括吗啉乙磺酸-盐酸、3-吗啉-2-羟基丙烷磺酸-盐酸和1,4- 哌嗪二乙磺酸-盐酸中任意一种或多种混合物。

其中，所述稳定剂为烷基酚聚氧乙烯醚和月桂醇聚氧乙烯醚中任意一种或两者混合物。

其中，所述激活剂为硫酸锌和氯化锌中任意一种或两者混合物。

其中，所述非离子型表面活性剂为曲拉通X-100和吐温TWEEN-20中任意一种或两者混合物。

其中，所述金属络合剂为乙二胺四乙酸钠盐和二乙烯基三胺基五乙酸中任意一种或两者混合物。

其中，所述α-L-岩藻糖苷酶测定试剂还包括防腐剂，所述防腐剂为叠氮钠和Proclin 300中任意一种或两者混合物。

本发明的一种α-L-岩藻糖苷酶测定试剂，所述α-L-岩藻糖苷酶测定试剂包括80～200mmol/L缓冲液、5～10g/L氯化钠、0.1～1g/L色源-岩藻糖苷底物、 0.5～2g/L稳定剂、0.1～2g/L激活剂、0.5～5g/L非离子型表面活性剂和2～5g/L 金属络合剂，通过加入所述稳定剂解决色源-岩藻糖苷底物水解反应导致试剂空白显著上升的问题，采用GOOD’S生物缓冲液和所述激活剂提高稳定性和灵敏度。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。