[发明专利]一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法在审

申请号：	201910901404.0	申请日：	2019-09-23
公开（公告）号：	CN110607260A	公开（公告）日：	2019-12-24
发明（设计）人：	齐智;孟双友;陈霞;程莉;刘丛丛	申请（专利权）人：	山东甲骨文生物科技有限公司
主分类号：	C12N1/20	分类号：	C12N1/20;C12R1/35
代理公司：	11797 北京专赢专利代理有限公司	代理人：	李斌
地址：	255300 山东省淄博市***	国省代码：	山东;37
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摘要：
搜索关键词：	猪肺炎支原体培养基猪血清氯化钠葡萄糖磷酸二氢钾磷酸氢二钾动物疫苗生产技术生产要求生长状态苯酚红蛋白胨低血清冻干粉酵母粉马血清添加量疫苗生长保证
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【说明书】：

本发明公开了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法，属于动物疫苗生产技术领域。该培养基包括以下组分：酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、马血清冻干粉、氯化钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、苯酚红。通过使用该培养基对猪肺炎支原体进行培养，在添加少量的猪血清情况下，也能够保持猪肺炎支原体良好的生长状态以及较快的生长速度，故可以大大降低在培养猪肺炎支原体时的猪血清添加量，从而可以在保证猪肺炎支原体的高培养效率情况下，还能降低猪肺炎支原体的培养成本，以达到猪肺炎支原体疫苗的生产要求。

技术领域

本发明涉及动物疫苗生产技术领域，具体是一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法。

背景技术

猪肺炎支原体，是引起猪的接触性慢性呼吸道疾病的重要病原之一，其会严重危害到猪的健康状况，尤其会导致猪的生长受阻以及使猪对饲料的转化率大幅度下降，继而引起其他疾病的发生。所以，对猪进行猪肺炎支原体疫苗预防是至关重要的。

另外，由于支原体是一种微小原核生物，其无细胞壁、生长速度慢、对培养的条件要求较为苛刻，故在猪肺炎支原体疫苗的生产和研究过程中，往往需要通过往培养基中添加猪血清，以便于对分离的猪肺炎支原体进行高效的培养。然而，使用传统培养基对猪肺炎支原体进行培养时，一般需要添加20%左右的猪血清，其血清用量较高，因此存在培养较高等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基及方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：

一种用于猪肺炎支原体低血清培养的培养基，包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉3-7g/L、蛋白胨15-20g/L、葡萄糖8-12g/L、马血清冻干粉6-10g/L、氯化钠3-7g/L、磷酸二氢钾0.1-0.4g/L、磷酸氢二钾0.5-2.5g/L、苯酚红0.005-0.02g/L。

本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉4-6g/L、蛋白胨16-18g/L、葡萄糖9-11g/L、马血清冻干粉7-9g/L、氯化钠4-6g/L、磷酸二氢钾0.2-0.3g/L、磷酸氢二钾1.3-1.7g/L、苯酚红0.008-0.012g/L。

本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的培养基包括以下按照质量浓度计的组分：酵母粉5g/L、蛋白胨17.5g/L、葡萄糖10g/L、马血清冻干粉7.5g/L、氯化钠5.2g/L、磷酸二氢钾0.24g/L、磷酸氢二钾1.56g/L、苯酚红0.01g/L。

本发明实施例还提供了一种用于猪肺炎支原体低血清培养的方法，其包括以下步骤：

（1）在无菌条件下，往上述培养基中添加猪血清，得到培养液；

（2）往上述培养液中加入猪肺炎支原体菌液，并置于恒温条件下进行摇瓶培养。

本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的步骤（1）中，猪血清与培养基的体积比为1:(8-12)。

本发明实施例采用的另一种优选方案，所述猪血清与培养基的体积比为1:9。

本发明实施例采用的另一种优选方案，所述的步骤（2）中，猪肺炎支原体菌液与培养液的体积比为1:(8-12)。