[发明专利]用于检测人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探针组合物、试剂盒及检测方法

说明书

本发明提供了一种用于检测人ApoE和SLCO1B1基因分型的引物探针组合物、试剂盒及检测方法，该引物探针组合物包括ApoE和SLCO1B1基因分型的特异性引物和特异性探针及内参试剂。通过本发明所揭示的引物探针组合物、试剂盒及检测方法，实现了同时对人血液DNA样本中的SLCO1B与ApoE中的四个基因分型SLCO1B1*1b(388G‑521T)、SLCO1B1*5(388A‑521C)、ApoE‑E4(388C‑526C)、ApoE‑E2(388T‑526T)基因分型的多态性检测，并具有高灵敏度、高特异性、低成本高通量、操作简便、实验周期短等优点，具有基因检测成本较低的技术优势。

技术领域

本发明涉及基因检测技术领域，尤其涉及一种用于检测人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探针组合物、试剂盒及检测方法。

背景技术

他汀类药物是当今世界应用最为广泛的降脂药物之一，通过有效降低血脂、稳定血管内斑块，对抑制心脑血管疾病的发生有显著作用。随着他汀类药物的广泛使用，研究者发现不同个体对不同他汀类药物的反应存在严重的差异，而导致差异的关键因素是他汀类药物在肝脏代谢和转运的遗传特性不同，主要由阴离子转运多肽(OATP1BI)由SLCOIBI基因编码以及载脂蛋白E(ApoE)的基因多态性决定。

阴离子转运多肽(OATP1BI)是一种重要的肝特异性转运体，由SLCO1B1基因编码。SLCO1B1基因突变引起编码的有机阴离子转运多肽活力减弱，表现为肝脏摄取药物能力降低，引起他汀类药物血药浓度上升，增加横纹肌溶解症或肌病的发生风险。因此，通过检测SLCO1B1基因*1B及*5(388A>G、521T>C)位点，可准确评估他汀类药物的毒性反应及疗效情况，为临床合理、安全使用他汀提供科学依据，实现患者个体化及有针对性的用药。

载脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)在脂质代谢中发挥重要作用。编码APOE的基因有3个等位基因，分别为E2、E3和E4。其中E3型为野生型ApoE，占人类的78％，属于常见基因型；E2型ApoE个体冠心病的风险降低而易患黄斑变性及Ⅲ类高脂血症；E4型ApoE个体增加老年痴呆症、冠心病、脑梗塞、视网膜色素变性等疾病风险。他汀类药物对E4型ApoE个体的疗效往往不佳，而对E2型ApoE携带者的降脂作用最强。因此，建议对正在或者考虑接受他汀降脂药物治疗的患者，进行SLCOIBI基因和ApoE基因的基因分型进行多态性检测，从而有效预估他汀的肌病发生情况及降脂治疗的效果，为合理选择他汀起始用量提供科学依据，以提高他汀用药的安全性。

目前，现有的对人SLCO1B1和ApoE基因分型检测方法包括：直接测序法、芯片杂交法及高分辨率溶解曲线法。直接测序法虽然灵敏度高，但是价格昂贵，工序繁琐，难以满足临床检测要求；芯片杂交法，检测灵敏度低并且特异性差，容易出现假阳性结果；高分辨率溶解曲线法对设备要求特殊，不适合临床推广，且检测灵敏度不高。

有鉴于此，有必要对现有技术中的人SLCO1B1和ApoE基因分型检测方法及相关技术予以改进，以解决上述问题。

发明内容

本发明的目的在于揭示一种用于检测人SLCO1B1和ApoE基因分型的引物探针组合物、试剂盒及检测方法，用以实现同时对人SLCO1B1*1b(388G-521T)、SLCO1B1*5(388A-521C)、ApoE-E4(388C-526C)、ApoE-E2(388T-526T)基因分型的多态性检测，以实现高灵敏度、高特异性、低成本高通量、操作简便、实验周期短等特点。

为实现上述第一个目的，本发明提供了一种用于检测人ApoE和SLCO1B1基因分型的引物探针组合物，包括：用于检测待检样品中ApoE和SLCO1B1基因分型的特异性引物和特异性探针，内参试剂；