[发明专利]一种LA-GFLG-DOX偶联物及其制备方法与用途

说明书

本发明涉及医药领域中抗肿瘤药物及其制备方法与用途，具体公开了一种LA‑GFLG‑DOX偶联物及其制备方法与用途，所述LA‑GFLG‑DOX偶联物为硫辛酸‑甘氨酸‑苯丙氨酸‑亮氨酸‑甘氨酸‑阿霉素分子通过酰胺键顺次连接形成的化合物。本发明在保留DOX对肿瘤细胞毒性的同时，利用LA的抗氧化能力，可以抵抗DOX产生的活性氧带来的对正常细胞的损伤。通过抗肿瘤活性检测及对正常细胞的毒副作用的实验可以看出，所述LA‑GFLG‑DOX偶联物对肿瘤细胞有明显的抑制作用，且可以减少对正常细胞的损伤，对降低DOX的毒副作用是有益的。

技术领域

本发明涉及医药领域中抗肿瘤药物及其制备方法与用途，尤其涉及一种LA-GFLG-DOX偶联物及其制备方法与用途。

背景技术

硫辛酸(lipoic acid,LA)是一种天然存在的抗氧化剂，属于B族维生素。它具有良好的脂溶性和水溶性，在水溶性和非水溶性条件下都可以发挥其抗氧化作用。硫辛酸可以分布在生物体内各个组织，也是人体中不可缺少的抗氧化物质，被称为“万能抗氧剂”。硫辛酸的抗氧化能力是维生素C和维生素E的400倍，在美、日等国已经被批准可以作为食品和保健品的功能成分。在细胞内，硫辛酸主要存在于细胞的线粒体中，清除体内的自由基等活性氧，抑制氧化应激，对氧化损伤有比较强的修复作用。因此，在预防及治疗与自由基有关的疾病如肿瘤、糖尿病、动脉粥样硬化、退化性神经系统疾病等发挥着重要的作用。

阿霉素(doxorubicin,DOX)作为一种蒽环类抗生素，是高效广谱的抗肿瘤药物。阿霉素可以嵌插在肿瘤细胞DNA的碱基对之间，阻碍DNA的复制而达到抗肿瘤作用。但在其治疗过程中，DOX本身缺乏肿瘤靶向性，在杀死肿瘤细胞的同时，也会对正常的组织、细胞带来伤害，如心脏毒性、骨髓抑制、听力损伤等毒副作用。这严重限制和影响了DOX的肿瘤治疗效果。DOX的毒性主要源于其在体内产生的活性氧带来的氧化应激和氧化损伤。

GFLG是由甘氨酸，苯丙氨酸，亮氨酸，甘氨酸通过酰胺键连接形成的小分子四肽化合物。研究发现，GFLG可被组织蛋白酶B特异性地识别并水解，而组织蛋白酶B在多种肿瘤细胞的溶酶体中高表达，在正常细胞中低表达，所以GFLG是一个具有良好应用前景的酶响应的小分子化合物。由于GFLG的酶响应特点，通常将其用作载体和药物之间的连接臂，使其在正常细胞中药物释放量很少，而在肿瘤细胞中释放药物，从而减少了对正常细胞的损伤作用。正是由于GFLG的这一特点，目前有一些GFLG和DOX的偶联物，在GFLG一端又修饰了其他多肽衍生物以提高其抗肿瘤特性，如中国专利文献CN102127154A和CN103768613。但是，在GFLG一端修饰LA以降低DOX毒副作用的偶联物目前尚无报道。

发明内容

针对DOX的毒副作用，结合LA的抗氧化特性，以及GFLG可被肿瘤细胞内高表达的组织蛋白酶B特异性水解切断的特点，本发明提供了一种新的化合物LA-GFLG-DOX偶联物及其制备方法与用途，在保留DOX对肿瘤细胞毒性的同时，利用LA的抗氧化能力，抵抗DOX产生的活性氧带来的对正常细胞的损伤。

本发明一方面提供了一种LA-GFLG-DOX偶联物，所述LA-GFLG-DOX偶联物为硫辛酸-甘氨酸-苯丙氨酸-亮氨酸-甘氨酸-阿霉素分子通过酰胺键顺次连接，其结构式如式(Ⅰ)所示。

本发明的另一方面提供了所述LA-GFLG-DOX偶联物的制备方法，包括以下步骤：

(1)通过缩合反应合成全保护的四肽化合物R₁-GFLG-R₂；

(2)对步骤(1)中所得化合物的氨基端脱除保护基连接硫辛酸，得到化合物LA-GFLG-R₂；

(3)对步骤(2)中所得化合物的羧基端脱除保护基并活化连接上阿霉素得到化合物LA-GFLG-DOX。