[发明专利]一种与鸡J亚群禽白血病抗性相关的分子标记及其应用

说明书

本发明提供了一种与鸡J亚群禽白血病抗性相关的分子标记及其应用，所述分子标记为TGFB2基因启动子区(GenBank登录号X58071.1)第486号位点甲基化，同时发明人利用该分子标记建立了快速筛选J亚群禽白血病抗性鸡的方法和试剂盒，并将该标记用于J亚群禽白血病抗病育种中，其有益效果在于，本发明从DNA甲基化的角度研究J亚群禽白血病抗性相关的分子标记，利用该标记能够简单、方便、快速、可靠、灵敏地检测鸡个体是否具有对J亚群禽白血病的抗性，从而区分易感鸡和抗性鸡，为筛选J亚群禽白血病抗性品种以及辅助传统的抗病杂交育种提供一条全新的途径，适于大规模推广应用。

技术领域

本发明属于抗性品种选育技术领域，更具体地，涉及一种与鸡J亚群禽白血病抗性相关的分子标记及其应用。

背景技术

禽白血病是由反转录病毒科、α反转录病毒属的禽白血病病毒(Avian LeukosisVirus，ALV)及禽肉瘤病毒(RSV)等引起的鸡的不同组织、细胞的良性及恶性肿瘤性疾病。该病自1886年被报道以来，在世界各地均有发生，是威胁世界养禽业的主要疾病之一，给世界养禽业带来巨大损失。

J亚群禽白血病(Avian leucosis Subgroup J)是由J亚群禽白血病病毒(Avianleukosis virus Subgroup J，ALV-J)在临床上引起的，以造血细胞恶性增生为主的多种肿瘤性疾病。相比于其他亚型，ALV-J传播速度更快，感染性更强，变异更快，而且具有较高的致死率。也正因如此，ALV-J迅速席卷全世界，世界养禽业也因此受到重创。2008-2009年间，ALV-J在我国大爆发，以血管瘤为主要特征的J亚群禽白血病对蛋鸡产业造成了巨大影响：因ALV-J感染而淘汰的商品代蛋鸡就有6000万只。大量的血清学调查表明，ALV-J已经成为危害我国养禽业的主要禽白血病病毒亚型。

目前，国际上尚无可有效防治J亚群禽白血病的药物和商品化疫苗，仅能通过淘汰阳性鸡、加强生物安全措施以达到控制的目的。但这种方法经常会出现假阴性或假阳性的结果，所以依然要通过抽检的方法对核心群进行监控，且各地方品种对ALV的易感性不同，净化标准难以制定。

发明内容

本发明针对于以上问题，提供一种与鸡J亚群禽白血病抗性相关的分子标记，所述分子标记包括鸡TGFB2基因启动子区GenBank登录号为：X58071.1的甲基化状态或甲基化程度。

TGFB2属于转化生长因子家族成员，本发明发现TGFB2基因启动子甲基化状态或甲基化程度在易感鸡与抗性鸡中存在的差异，在J亚群禽白血病抗性鸡(阴性)中，TGFB2的启动子甲基化程度高于易感鸡(阳性)，且TGFB2的基因表达情况明显低于易感鸡(阳性)，推测TGFB2基因启动子DNA甲基化可抑制TGFB2表达，进而产生对ALV-J的抗性。

进一步，所述标记为TGFB2基因的启动子区的CpG岛上的甲基化状态或甲基化程度。

进一步，所述标记为TGFB2基因的启动子区域CpG岛上的位点甲基化。

CpG岛通常位于基因启动子、第一外显子和3’端区域，被认为是复制起始点。通常情况下，CpG岛中的CG位点处于非甲基化状态，而其甲基化状态发生改变，通常会引起基因的异常表达。

进一步，所述甲基化的位点位于TGFB2基因启动子区GenBank登录号为：X58071.1的第486号位点，该位点同时位于鸡的第三号染色体的第18755007号，记为chr3：18755007。

本发明发现，在J亚群禽白血病抗性鸡(阴性)中，TGFB2的启动子的chr3：18755007位点甲基化，而在易感鸡(阳性)中，chr3：18755007位点为未甲基化状态，说明chr3：18755007位点的甲基化状态可作为鸡J亚群禽白血病相关的分子标记。

本发明还提供一种所述分子标记在辅助鸡抗病育种中的应用。