[发明专利]检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒

说明书

本发明提供一种检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒，适用于聚合酶连锁反应，试剂盒包含引物对，引物对包含如序列辨识编号1所示的正向引物和序列辨识编号2所示的反向引物。由此，可以快速且特异性地自待测样本中检测鲤春病毒血症病毒。

技术领域

本发明是有关一种核酸的测定和检验方法，特别是有关于一种利用聚合酶连锁反应检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒及其检验方法。

背景技术

鲤春病毒血症(Spring viraemia of carp,SVC)又称鲤鱼传染性腹水症，是由鲤春病毒血症病毒(Spring viremia of carp virus,SVCV)引起的急性、出血性并伴有高度传染的流行病，会严重危害渔业生产并能造成毁灭性打击。

鲤春病毒血症病毒分类于棒状病毒科(Rhabdoviridae)，疱病毒属(Vesiculovirus)。由单链、负股RNA组成，基因组包含11019个核苷酸，可转译出5个结构蛋白质，分别为核蛋白(nucleoprotein,N)、磷蛋白(phosphoprotein,P)、基质蛋白(matrixprotein,M)、醣蛋白(glycoprotein,G)及核醣核酸相关聚合酶(RNA-dependent RNApolymerase,L)。有一层囊膜，病毒大小约为180×70nm，在CsCl中的浮密度为1.195-1.200g/mL。根据其结构蛋白组分可把鲤春病毒血症病毒列入水泡性口炎类，且目前研究证明鲤春病毒血症病毒只有一种血清型。

鲤春病毒血症病毒通常感染鲤科鱼类，在鲤、锦鲤、草鱼、鲢、鳙、黑鲫和鲫等鱼中可发生明显的症状，但鲤是其中最敏感的宿主。鲤春病毒血症以全身出血及腹水、发病急、死亡率高为特征，常常于春季暴发并引起幼鱼和成鱼死亡。在急性感染时，染病鱼体的肝、肾、脾、鳃、及脑为高力价病毒存在器官。鲤春病毒血症最早流行于欧洲、中东和俄罗斯，近年来传播到美洲和亚洲。世界动物卫生组织(OIE)将其列为必报的重要疫病。也为2008年我国新颁布的动物疫病名录中将其列为一类动物疫病。因此开发快速、方便及准确检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒及其检验方法，以方便鲤春病毒血症的现场或实验室检测至为关键。

发明内容

有鉴于此，本发明的一目的是在提供一种检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒，可以快速且特异性地自待测样本中检测鲤春病毒血症病毒。

本发明的一方式是在提供一种检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒，用于隔绝恒温式聚合酶连锁反应且包含一引物对，所述引物对包含一序列辨识编号1所示的正向引物以及一序列辨识编号2所示的反向引物。

依据前述的检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒，可更包含一如序列辨识编号3所示的荧光探针。

依据前述的检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒，可更包含一反转录聚合酶连锁反应所需的试剂。

由此，本发明的检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒用于隔绝恒温式聚合酶连锁反应，能快速、特异、方便且准确地检测待测样本中是否存在鲤春病毒血症病毒，显示待测样本已感染鲤春病毒血症病毒。检测结果除了可经由一般常规跑胶确认结果外，搭配可携式的荧光核酸分析仪检测结果更不需复杂的资料判读，即使未受过专业训练的人员，也能利用本发明的试剂盒进行鲤春病毒血症病毒的检测，可用于田野间水产养殖渔业的检测，能快速且准确的诊断病原感染以供提早防治。

上述发明内容旨在提供本揭示内容的简化摘要，以使阅读者对本揭示内容具备基本的理解。此发明内容并非本揭示内容的完整概述，且其用意并非在指出本发明实施例的重要/关键组件或界定本发明的范围。

附图说明

为让本发明的上述和其他目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，所附图式的说明如下：

图1表示依照本发明的一实施方式的检测鲤春病毒血症病毒的试剂盒的结构示意图。

图2表示本发明的另一实施方式的检测鲤春病毒血症病毒的检验方法的步骤流程图。