[发明专利]一种超深渊来源溶菌酶及其制备方法

权利要求书

1.Eurythenes gryllus溶菌酶基因，其特征在于编码Eurythenes gryllus溶菌酶的核苷酸序列，记作EgLyz。

2.如权利要求1所述Eurythenes gryllus溶菌酶基因，其特征在于其分子类型为DNA，序列特征：长度为507bp，类型为核酸，链性为双链，拓扑结构为线性，所述Eurythenesgryllus溶菌酶基因EgLyz的序列如下所示，其中1～102bp为信号肽序列，记为SEQ IDNo.1：

3.如权利要求1所述Eurythenes gryllus溶菌酶基因，其特征在于核苷酸序列采用以下方法获得：

提取Eurythenes gryllus的总RNA，反转成cDNA，以合成序列SEQ ID No.4和SEQ IDNo.5作为引物，经PCR扩增获得EgLyz基因核苷酸序列SEQ ID No.1，经分析可知1～102bp为信号肽序列；切除信号肽后的EgLyz基因序列为SEQ ID No.2：

之后以合成序列SEQ ID No.6和SEQ ID No.7作为引物，经PCR扩增获得切除信号肽后的EgLyz基因核苷酸序列，然后通过原核重组表达EgLyz基因，纯化EgLyz基因的表达产物；

所述合成序列SEQ ID No.4：GGTCATCATCAACAACAAACT；

所述合成序列SEQ ID No.5：GGTTAAGTGTTCAGGTAGTGGCG；

所述合成序列SEQ ID No.6：CGGGATCCCAAGACTCCACCTGTCTAGGGTG；

所述合成序列SEQ ID No.7：CGGAATTCTCACCCTGTAGCAGCTGTCAACACG。

4.Eurythenes gryllus溶菌酶，其特征在于所述Eurythenes gryllus溶菌酶EgLyz的分子类型为蛋白质，序列特征：长度为134aa，类型为氨基酸，所述Eurythenes gryllus溶菌酶EgLyz的氨基酸序列如下所示，记为SEQ ID No.3：

5.如权利要求4所述Eurythenes gryllus溶菌酶，其特征在于所述Eurythenesgryllus溶菌酶EgLyz的蛋白具有SEQ ID No.3所示氨基酸序列的多肽；或将SEQ ID No.3氨基酸序列经过至少一个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成，且具有与SEQ ID No.3所示的氨基酸序列相似功能的多肽。

6.如权利要求4所述Eurythenes gryllus溶菌酶的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)Eurythenes gryllus总RNA提取和反转录；

2)Eurythenes gryllus溶菌酶基因EgLyz的PCR扩增和序列分析；

3)Eurythenes gryllus溶菌酶EgLyz的重组表达与纯化。