[发明专利]一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法

说明书

本发明提供了一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法，属于生物技术及分子生物技术领域。本发明提供的检测5型牛腺病毒的核酸组合，针对5型腺病毒设计，针对性强，特异性强，灵敏度高；将上述核酸组合用于检测的试剂盒中，能方便检测，提高检测的稳定性；通过利用该核酸组合进行检测，提高检测结果的可信度，具有较好的实际应用价值。

技术领域

本发明涉及生物技术及分子生物技术领域，具体而言，涉及一种检测5型牛腺病毒的核酸组合、试剂盒及应用与检测方法。

背景技术

牛腺病毒(Bovine adenovirus，BAV)，为腺病毒科哺乳动物腺病毒属的成员。目前已报道牛腺病毒总共有10个血清型，BAV-1、-2、 -3、-9、-10型牛腺病毒属于哺乳动物腺病毒属，而BAV-4、-5、-6、-7和-8型属于腺胸腺病毒属。牛腺病毒5型的基因组是双链的DNA 分子，感染牛的临床症状主要包括结膜炎、肺炎、腹泻和多发性关节炎，被感染犊牛出现发热和食欲不振等症状及肺脏实变的肉眼病变。近年来，我国许多地区牛群中爆发了牛呼吸道传染病，死亡率达 10％-50％，造成严重的经济损失。对该疫情进行流行病学调查和分析，表明牛腺病毒在其中起了很重要的作用。牛腺病毒的快速检测是控制和消灭该病的前提，但腺病毒的常规检测方法一般分为免疫学方法、生物学试验、分子生物学诊断技术等方法，但是都存在难以早期诊断、敏感度第等缺点。

发明内容

一方面，本申请实施例提供了一种检测5型牛腺病毒的核酸组合，该核酸组合能较为灵敏的识别5型牛腺病毒，特异性较强；还提供一种检测5型牛腺病毒的试剂盒，方便检测；将试剂盒应用于检测，能提高检测效率，检测精度和准确性和稳定性都能得到提高。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

一种检测5型牛腺病毒的核酸组合，核酸组合包括检测引物对和检测探针；检测引物对的碱基序列如SEQ ID No.1-2所示；检测探针的碱基序列如SEQ ID No.3所示；检测探针5’端包括荧光报告基团，检测探针3’端包括荧光淬灭基团。

一种检测5型牛腺病毒的试剂盒，试剂盒包括上述的检测5型牛腺病毒的核酸组合。

上述的检测5型牛腺病毒的试剂盒在检测5型牛腺病毒中的应用。

一种5型牛腺病毒的检测方法，包括以下步骤：

构建5型牛腺病毒的阳性模板，并梯度稀释后利用上述的检测5 型牛腺病毒的核酸组合分别进行扩增，建立标准曲线；

提取待检样本的基因组，利用上述的检测5型牛腺病毒的核酸组合进行扩增，根据扩增结果结合标准曲线，结算得到待检样品Ct值，根据Ct值判断检测结果。

与现有技术相比，本发明的有益效果包括：本发明提供的检测5 型牛腺病毒的核酸组合，针对5型腺病毒设计，针对性强，特异性强，灵敏度高；将上述核酸组合用于检测的试剂盒中，能方便检测，提高检测的稳定性；通过利用该核酸组合进行检测，提高检测结果的可信度，具有较好的实际应用价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定。对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为本发明实验例提供阳性模板验证结果图；

图2为本发明实验例提供的标准曲线示意图；

图3为本发明实验例提供的特异性实验结果图。

具体实施方式