[发明专利]一种基于病原真菌孢子形态快速鉴定植物真菌病害的方法

说明书

本发明公开了一种基于病原真菌孢子形态快速鉴定植物真菌病害的方法。本发明方法适用于快速鉴定植物病部产生大量孢子的真菌病害，所述方法包括如下步骤：1)在取样载玻片表面涂抹一层均匀的凡士林薄层，置于样品盒内带至田间；2)在田间找到具有植物真菌病害典型症状的病部组织及明显病征，用载玻片上涂有凡士林的一面贴抹于植物病部霉层上，收集病原真菌孢子；3)在实验室内于光学显微镜下镜检植物病部真菌孢子的形态学特征，并结合植物的典型病状，快速鉴定植物真菌病害。本发明可直接获得植物病部的大量真菌孢子，通过快速简便的形态学鉴定方法，并结合植物病状典型特征，实现对植物常见真菌病害及时、准确的诊断。

技术领域

本发明涉及一种基于病原真菌孢子形态快速鉴定植物真菌病害的方法，适用于快速鉴定或初步诊断植物病部产生真菌孢子的常见真菌病害，属于植物保护领域。

背景技术

植物病害的爆发和流行往往导致其产量损失和品质下降，最终影响经济效益。对植物病害及时准确的诊断，是采取合适措施、开展有效防控工作的前提。通常采用柯赫氏法则对植物侵染性病害进行诊断，即对植物病部的病原物进行分离培养，随即接种至相同品种的健康植株上，观察其是否表现出相同的病害症状；再对此病部病原菌进行分离鉴定，最终确定病原物种类。

在实际生产中，针对常见的植物真菌病害，目前常用的检测方法可分为两类：一类是基于图像检测与模式识别技术，通过检测植物病害图像进行病害诊断。此类技术操作简便，但由于田间病害症状往往比较复杂，导致植物病害检测的准确性较低。另一类则是使用形态学及分子生物学检测手段，通过对病原物进行鉴定，最终确定病害种类。此类方法检测效率和准确性较高，但由于需要对病部组织上的病原物进行分离培养，容易出现杂菌污染、培养方式不当等问题。不仅检测周期较长，还可能由于分离失败而影响检测结果。

发明内容

本发明要解决的技术问题是如何快速鉴定常见的植物真菌病害。

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种基于病原真菌孢子形态快速鉴定植物真菌病害的方法。

本发明提供的基于病原真菌孢子形态快速鉴定植物真菌病害的方法包括如下步骤：

1)用涂有凡士林的载玻片粘取植物病部组织，以获取所述植物病部组织表面的病原真菌孢子；

2)镜检所述植物病部组织表面的病原真菌孢子的形态学特征，确定其真菌种类，并结合植物病状特征鉴定植物真菌病害种类。

上述方法中，所述1)中，所述植物病部组织具有植物真菌病害典型症状；

进一步的，所述植物真菌病害典型症状可为如下至少一种：霉状物、粉状物、点状物、锈状物和丝状物。

上述方法中，所述1)中，所述涂有凡士林的载玻片的制备方法如下：将凡士林均匀涂抹于载玻片的一面。

进一步的，将凡士林均匀刮涂于载玻片的一面，且尽量薄，避免涂抹过厚。

更进一步的，所述凡士林为白凡士林。所述白凡士林具体为国药集团的产品，CAS编号：8009-03-8，产品编号：69047662。

所述载玻片为单头单面磨砂，其规格具体为26mm×76mm，型号具体为CAT.7105P。

在本发明的具体实施例中，所述涂有凡士林的载玻片的制备方法如下：用钢尺刮取适量(0.01g)的白凡士林，沿载玻片表面由左向右轻轻刮涂，涂成均匀薄层，置于样品盒内待用。

上述方法中，所述1)中，所述用涂有凡士林的载玻片粘取植物病部组织的方法为将涂有凡士林的载玻片直接贴抹于植物病部组织上。在实际应用中，也可以取下含有病部组织(如病斑)的植物叶片，然后将所述植物叶片上的病部组织(如病斑)贴抹于涂有凡士林的载玻片的取样区内。