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公布日期
2020-11-20 公布专利
2020-11-17 公布专利
2020-11-13 公布专利
2020-11-10 公布专利
2020-11-06 公布专利
2020-11-03 公布专利
2020-10-30 公布专利
2020-10-27 公布专利
2020-10-23 公布专利
2020-10-20 公布专利
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[发明专利]一种病毒核酸提取试剂盒及提取方法在审

1.一种病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,包含以下组分:裂解液、漂洗液1、漂洗液2、洗脱液、蛋白酶K和磁珠;

所述裂解液包含以下浓度的组分:1.0~5.0mol/L高氯酸钠、10~200mmol/L Tris-HCl、1~50mmol/L EDTA和50~100uL/mL Triton X-100;所述Tris-HCl的pH值为7.5~8.5,EDTA的pH值为7.5~8.5;

所述漂洗液1为2.0~5.0mol/L高氯酸钠溶液,且所述高氯酸钠溶液的溶剂为70~80%乙醇;

所述漂洗液2包含以下组分:DEPC水和无水乙醇,且所述DEPC水和无水乙醇的体积比为(3~4):(6~7);

所述洗脱液为8~12mmol/L Tris-HCl-DEPC水溶液,且pH值为7.5~8.5。

2.根据权利要求1所述的病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述裂解液包含以下组分:1.74mol/L高氯酸钠、35mmol/L Tris-HCl、7mmol/L EDTA和70uL/mL Triton X-100;所述Tris-HCl的pH值为8.0,EDTA的pH值为8.0。

3.根据权利要求1所述的病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述漂洗液1为2.0mol/L高氯酸钠溶液,且所述高氯酸钠溶液的溶剂为75%乙醇。

4.根据权利要求1所述的病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述漂洗液2中DEPC水和无水乙醇的体积比为3:7。

5.根据权利要求1所述的病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述洗脱液为10mmol/LTris-HCl-DEPC水溶液,且pH值为8.0。

6.根据权利要求1所述的病毒核酸提取试剂盒,其特征在于,所述蛋白酶K的浓度为15~25mg/mL;所述磁珠为二氧化硅磁珠。

7.利用权利要求1~6任一项所述病毒核酸提取试剂盒进行病毒核酸提取的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)向提取容器中依次加入蛋白酶K、待提取样本、裂解液和磁珠,混合均匀进行裂解;

(2)向步骤(1)获得的裂解液中加入漂洗液1,混合均匀,弃液体,保留磁珠;

(3)向步骤(2)获得的磁珠中加入漂洗液2,混合均匀,弃液体;重复漂洗一次,弃液体,保留磁珠;

(4)向步骤(3)获得的磁珠中加入洗脱液进行洗脱,弃磁珠,即得所述病毒核酸。

8.根据权利要求7所述的病毒核酸提取的方法,其特征在于,所述步骤(1)中蛋白酶K、待提取样本、裂解液和磁珠的体积比为5:20:40:1。

9.根据权利要求7所述的病毒核酸提取的方法,其特征在于,所述步骤(1)中裂解条件为:于50~60℃裂解10~30min。

10.根据权利要求7所述的病毒核酸提取的方法,其特征在于,所述步骤(4)中洗脱条件为:于50~60℃洗脱5~15min。

申请号: 201810867325.8 申请日: 2018-08-02
公开/公告号: CN108753767A 公开/公告日: 2018-11-06
申请/专利权人: 广州奕昕生物科技有限公司
发明/设计人: 陈永恒;谭杰峰;宋卉
主分类号: C12N15/10
分类号: C12N15/10
搜索关键词: 病毒核酸 漂洗液 高氯酸钠 提取试剂盒 无水乙醇 裂解液 洗脱液 避免污染 发明试剂 试剂配方 提取效率 蛋白酶K 试剂盒 体积比 溶剂 乙醇 磁珠 优化
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