[发明专利]生物标志物在卵巢癌评估中的应用

说明书

本文提供生物标志物在卵巢癌评估中的应用。本文提供来自外泌体的生物标志物的检测试剂在制备用于评估、诊断和/或监测受试者卵巢癌的组合物或试剂盒中的用途，其中所述生物标志物包括c5a，还可以包括另外的卵巢癌生物标志物，例如CA125，HE4和PLG中的一种或多种。本文还提供包括所述生物标志物检测试剂的组合物或试剂盒。本文公开的方法、组合物和试剂盒能够有效用于卵巢癌的评估、诊断和/或监测。

技术领域

本发明一般性涉及癌症的诊断/分级/分期和预后的领域，更具体来说，本发明涉及卵巢癌的领域。本发明还涉及了包括生物标志物表达的卵巢癌诊断、分级、分期和预后领域，并且还提供了相关的分析试剂、诊断模型、测试试剂盒和临床分析。

背景技术

卵巢癌是致死率最高的妇科癌症，仅在2015年，中国约5.2万人被诊断为卵巢癌患者，且2.25万人因此死亡。卵巢癌病人的死亡率在近三十年来没有明显改变，晚期病人的5年生存率不超过20％，而I期病人的5年存活率可以达到90％。然而绝大多数病人在确诊时都已经是晚期，因此，开发早期筛查卵巢癌的诊断产品将可能提高病人的存活率，降低卵巢癌的死亡率。

卵巢细胞的突变理论上可以通过检测血液中的特定的蛋白而被发现。实际操作中，由于检测仪器和试剂的限制，少数细胞的突变带来的变化无异于大海捞针，非常难以被检测。所以突变的信息需要被浓缩或检测仪器试剂的灵敏度显著上升的情况下才可以在早期被发现。市售卵巢癌相关的生物标记物试剂主要为糖链抗原-125(cancer antigen 125，CA125)和人附睾蛋白4(Human epididymis protein 4，HE4)两种，两种指标实际都通常被用为确诊后对于复发和病情发展的检测手段。近期的多个研究发现，这两种试剂在早期病人的诊断和筛查都难以达到理想的敏感性、特异性和阳性预测值。

已经对卵巢癌的生物标志物进行了许多研究。例如，WO2005034732公开了涉及其中SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31、SEQ ID NO：33、SEQ IDNO：35、SEQ ID NO：37、SEQ ID NO：39、SEQ ID NO：41或SEQ ID NO：43任一序列的完整或部分序列的DNA作为卵巢癌的标志基因。WO2005098447提及Apo A1、修饰的Apo A1、甲状腺素运输蛋白ΔN10、天然甲状腺素运输蛋白、半胱氨酰化甲状腺素运输蛋白、磺化甲状腺素运输蛋白、CysGly修饰的甲状腺素运输蛋白、谷胱甘肽化甲状腺素运输蛋白、IAIH4片段No.1、IAIH4片段No.2以及IAIH4片段No.3及其组合物作为生物标志物用于确定卵巢癌状态。WO2007002264公开了CTAP3相关蛋白质和CA125、转铁蛋白、结合珠蛋白、ApoA1、转甲状腺素蛋白、ITIH4内部片段、beta 2-微球蛋白、hepcidin、prostatin、骨桥素、esoinophil衍生神经毒素、瘦素、催乳素、IGF-II、血红蛋白及其修饰形式、CA125II、CA15-3、CA19-9、CA72-4、CA 195、肿瘤相关胰蛋白脢抑制剂(TATI)、CEA、胎盘碱性磷酸酶(PLAP)、唾液酸(Sialyl)TN、半乳糖转移酶、巨噬细胞集落激激因子(M-CSF，CSF-1)、溶血磷脂酸(LPA)、表皮生长因子受体胞外段的110KD成分(p110EGFR)、组织激肽释放酶原，如激肽释放酶6和激肽释放酶10(NES-1)、丝氨酸蛋白水解酶(prostasin)、HE4、肌酸激酶B(CKB)、LASA、HER-2/neu、尿促性腺激素肽、Dianon NB 70/K、组织肽抗体(TPA)、SMRP、骨桥素和结合珠蛋白、类胰岛素生长因子I以及类胰岛素生长因子II等用于鉴定卵巢癌状态。WO2015042115提及用于进行卵巢癌评估的生物标志物的实例包括：醛脱氢酶1(ALDH1)、ApoCI、ApoAII、ApoCII、β-血红蛋白、钙周期蛋白、钙粒蛋白A、钙粒蛋白C、紧密连接蛋白(claudin)-3、结缔组织生长因子(CTGF)、嗜酸粒细胞衍生神经毒素、成纤维细胞生长因子2(碱性)(FGF2)、叶酸盐受体1(FOLR1)、生殖糖蛋白(glycodelin)、GPCR49、谷胱甘肽S-转移酶θ1(GSTT1)、hepsin、铁调素(hepcidin)、胰岛素样生长因子-II、间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H4(inter-α-trypsininhibitor heavy chain H4)、激肽释放酶相关肽酶6(KLK6/7)、激肽释放酶10、瘦素、巨噬细胞抑制因子、粘蛋白-16(CA125)、骨桥蛋白、促乳素、蛋白酶丝氨酸8(proteaseserine 8)(PRSS8)、蛋白C抑制剂、溶质携带物家族39(锌转运体)成员4(SLC39A4)、小MBL相关蛋白C端片段、角质层糜蛋白酶(stratumcorneumchymotryticenzyme)、转铁蛋白、运甲状腺素蛋白、WAP四二硫化物核心域2(WAPfour-disulfidecore domain2)(HE4)、含有磷酸化Src同源区2结构域的转化蛋白1(Shc)、含有磷酸化Src同源区2结构域的E(She)、以及特异于酪蛋白激酶1ε的自身抗体等。