[发明专利]一种APOE和SLCO1B1基因多态性检测试剂盒

说明书

本发明提供一种APOE和SLCO1B1基因多态性检测试剂盒，所述试剂盒含有用于检测APOE基因T388C、C526T多态性位点的如SEQ ID NO.1‑6所示引物和用于检测SLCO1B1基因A388G、T521C多态性位点的如SEQ ID NO.7‑12所示引物，以及如SEQ ID NO.13‑20所示的内部质控管家基因引物。本试剂盒应用了ARMS‑PCR和荧光熔解曲线技术进行荧光PCR，实现在同一反应管中检测两种基因一种多态性的准确检测，灵敏度高，特异性强，可以满足口腔上皮细胞，干血片和全血样本的检测。整个检测过程耗时短，能在第一时间给医生提供用药依据，降低患者用药风险。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体地说，涉及一种APOE和SLCO1B1基因多态性检测试剂盒。

背景技术

APOE基因是编码人类载脂蛋白E(apolipoprotein E，APOE)的基因，该基因定位于染色体19p13，有4个外显子和3个内含子，其所编码的APOE蛋白属载脂蛋白家族，是血浆脂蛋白的重要组成部分，主要在肝脏和脑组织中表达，通过多种途径参与机体的脂质代谢，是影响血脂水平的重要内在因素。

研究表明，APOE基因具有核苷酸多态性，其中最常见的两个单核苷酸多态性位点为APOE T388C(rs429358)和APOE C526T(rs7412)，共形成3种单倍体，分别为E2(388T-526T)、E3(388T-526C)、E4(388C-526C)三种蛋白表型，生成包括三种纯合子(E2/E2、E3/E3、E4/E4)和三种杂合子(E3/E2、E4/E2、E4/E3)在内的6种APOE基因型。其中，E2等位基因携带者，其血液中APOE浓度高，胆固醇含量低，对动脉粥样硬化有防护作用；而E4等位基因携带者，其血液中APOE浓度低，胆固醇及三酰甘油含量高，是动脉粥样硬化的潜在危险因素。E4等位基因携带者患冠心病的风险要高40％，并且他汀类药物对E4等位基因携带者疗效往往不佳或无疗效，而对E2携带者的降脂作用最强。

APOE异构体与脂蛋白受体的亲和性及其在体内的代谢速度不同，从而导致个体间血脂水平的差异。临床上可根据APOE不同的基因表型指导患者正确选择调脂药物和饮食干预治疗，以达到降低冠心病的发病率和心血管疾病突发的风险。研究表明，E2型为长寿基因型，对他汀类药物敏感，故此类患者调脂可首选他汀类药物作为降脂药。E3型人群占人群中的大多数，对于他汀类药物降脂的效果正常，对于心脑血管的发病没有明显倾向性。E4型人群发生早发性心血管病、老年痴呆的风险较高，血脂异常时运用他汀类药物治疗效果比E2型、E3型人群的差，可选用普罗布考治疗，采用低脂饮食降脂效果效果明显。

服用他汀类药物的人群多为患有冠心病、心肌梗死等心血管疾病的病人，通过对APOE基因型检测，能够指导医生在有效地救治期限内进行精确用药，提高药物使用有效性，降低毒副作用。他汀类药物(statins)是三羟基三甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，自从问世以来就成为世界上临床使用最为广泛的降脂药，该类药物对抑制心脑血管疾病也有显著作用。他汀类药物通过竞争性抑制HMG-CoA(三羟基三甲基戊二酰辅酶A)还原酶从而减少胆固醇的生物合成，阻断细胞内羟甲戊酸代谢途径，使细胞内胆固醇合成减少，从而反馈性刺激细胞膜表面(主要为肝细胞)低密度脂蛋白受体数量和活性增加、使血清胆固醇清除增加、水平降低，进而达到降低血脂的作用，是目前防治冠心病、脑中风、高血脂、动脉粥样硬化的首选用药。