[发明专利]一种载富勒烯人工髓核配方的制备方法

说明书

本发明涉及人工髓核制备领域，具体为一种载富勒烯人工髓核配方的制备方法，该载富勒烯人工髓核配方的制备方法，采用半成型的设计思路，可通过较小的侵入性植入患处，降低手术风险和术后移位的问题；将富勒烯加入人工髓核内，可降低髓核内自由基含量，达到减缓椎间盘退化的目的。将人工髓核设计成内层为干凝胶且外层为静电纺丝膜的结构，一方面可以利用外层的三维网状纤维膜可将内层的干凝胶包裹住，又不影响干凝胶的水化、膨胀又能起到防止凝胶移位，降低溢出的风险；另一方面能根据实际需要调节填充干凝胶的质量和纤维膜的直径，达到更好的填充的效果，更好的恢复椎间盘结构，且产品为干燥固体，易于保存，保存期长。

技术领域

本发明涉及人工髓核制备领域，具体为一种载富勒烯人工髓核配方的制备方法。

背景技术

据统计，2015年中国65岁及以上人口为14434万人，占全国人口的1/10以上，近十年65岁及以上人口逐年增加，意味着老年脊柱退行性疾病伴随着人口老龄化的高峰的即将到来也会呈现较高的增长趋势，导致活动受限和颈肩腰腿痛。椎间盘退变是导致脊柱退行性疾病的前提和病理基础，且椎间盘组织再生能力有限，一旦发生退变，很难阻止或逆转。

近年来的研究发现，椎间盘退变发生是多因素参与的过程，其中髓核细胞老化在椎间盘退变的过程中扮演着重要角色。细胞老化体现在细胞增殖能力及细胞数量丢失，同时细胞老化后TNF-α、IL-(1、6、8、10、20)、NO、PGE-2等炎症因子的分泌增加，进一步恶化邻近细胞的生存微环境，加速椎间盘细胞的老化。故通过控制炎症来改善细胞微环境，能在延缓椎问盘退变过程中起到重要作用。

椎间盘由髓核和纤维环组成，髓核内营养物质的降低和活性细胞数量减少可导致椎间盘盘的退化和功能丧失。有实验证明：保留纤维环，通过代替和补充髓核可以缓解疼痛，可保持椎间盘的完整和稳定，预防纤维环的进一步磨损，提高椎体高度和活动度。随着组织工程技术和材料学的发展，利用生物相容性材料结合可抗炎的富勒烯材料制备成可代替髓核的假体，为椎间盘修复提供了一种新的治疗思路。

通过预成形、原位注射成形和半成形的设计思路，制备成可代替髓核的假体各有优缺点。预成形人工髓核结构可控制和对外界的反应更快，但需要较高的手术侵入性。原位注射成型的手术风险小，在体内成型后可与髓核空腔壁紧密相贴，但机械性能不佳，三维结构很难控制，有纤维环切口和可能存在的纤维环裂隙溢出的风险。半成形人工髓核的设计思路介于二者之间，根据实际的需要设计植入体的尺寸，一种是放入经脱水处理的半成形凝胶假体，放入椎间隙后凝胶水化、膨胀；另外一种是向摘除的髓核腔内放入可折叠变形的气囊，再注入可原位凝固成半固态的高分子材料使气囊充分膨胀，进而使塌陷的椎间盘恢复应有的高℃。虽然近年来有许多关于人工髓核的研究，并取得一定进展，但是我们也发现临床上人工髓核多为预制式的，原位注射成形和半成形的人工髓核的设计还需进一步的研究。

椎间盘的退化过程中细胞的老化和凋亡起着重要作用，在退行性变过程中，椎间盘细胞的功能发生一系列的变化，数量和活力都会下降，基因表达也会与正常细胞有所差异。承认的椎间盘是无血管组织，氧含量较低，故髓核适于在无氧环境中保存活力。一旦椎间盘所受的生物力学发生变化机会引发氧自由基的大量产生，使髓核暴露在氧含量相对较高的环境中。氧自由基会直接损伤蛋白、脂质和DNA，抑制细胞的信号通路，导致细胞老化。通过在人工随和引入降低能降低髓核内氧自由基的含量的药物或材料，减缓髓核的进一步退化也是一种好的设计人工髓核的思路。目前针对髓核内氧自由基清除的研究还较少，而且，目前尚未有可以具备抗炎作用人工髓核的报道或者应用。

发明内容

本发明解决的技术问题在于克服现有技术的缺陷，提供一种载富勒烯人工髓核配方的制备方法。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种载富勒烯人工髓核配方的制备方法，该载富勒烯人工髓核配方的制备方法包括以下步骤：

S1、壳聚糖/Ⅱ型胶原蛋白/β-甘油磷酸钠/羟乙基纤维素干凝胶的制备：