[发明专利]一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法

权利要求书

1.一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法，步骤如下：

（1） 采集成熟但未裂开的格力兜兰果荚，用软毛刷蘸取洗衣粉清洗表面后自来水清洗，在无菌工作台用蒸馏水清洗果荚表面后，用质量浓度为70 %-75 %的酒精擦拭果荚表面20-30s，再用质量浓度5%-10%的次氯酸钠溶液浸泡消毒15-20 min，灭菌蒸馏水冲洗干净，用无菌剪刀将果荚剪成两段，获得格力兜兰种子；其特征在于，还包括如下步骤：

（2）用无菌镊子夹着包含格力兜兰种子的果荚，将种子播撒于种子萌发培养基表面，于25 ℃下暗培养至种子萌发，统计种子萌发率；种子萌发培养基产生白色原球茎后，将其转移至光照下继续培养，光照时间为12 h/d，待原球茎全变为绿色后，转接至格力兜兰原球茎转接培养基中继续光照培养；

所述的种子萌发培养基配方为：1 g/L的花宝1号、7 g/L琼脂、20 g/L蔗糖、0.5 g/L活性炭粉和10 g/L椰子粉；

所述种子萌发培养基配制：称取1 g 花宝1号粉末，用1 L 加热沸腾的蒸馏水溶解，再加入20 g 蔗糖和7 g 琼脂作为基础培养基，在基础培养基中同时加入10 g椰子粉和0.5 g活性炭后，超声溶解1 h，使琼脂完全溶解，活性炭均匀分散，将配制的种子萌发培养基分别取20 ml 倒入50 ml 三角瓶中分装，共设10个重复，用封口膜将三角瓶瓶口密封；

（3） 在超净工作台中将原球茎全变绿的种子萌发培养基用无菌小刀切成直径约5 mm的圆形琼脂块，用无菌镊子夹着琼脂块转接到格力兜兰原球茎转接培养基中，每个转接培养基均匀的放4-5个琼脂块，转接完成后置于光照下继续光照培养，光照时间为12 h/d；

所述的格力兜兰原球茎转接培养基配方为：1 g/L花宝1号、7 g/L琼脂、20 g/L蔗糖、0.5 g/L活性炭粉、10 g/L椰子粉、1.0 mg/L细胞分裂素6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）和0.2 mg/L植物生长素萘乙酸（NAA）。

2.根据权利要求1所述的一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法，其特征在于：步骤（1）中所述格力兜兰果荚表面的消毒方法为：先用质量浓度为75 %酒精擦拭果荚表面，然后用质量浓度10%次氯酸钠溶液浸泡消毒20 min后，用大量灭菌蒸馏水进行清洗。

3.根据权利要求1所述的一种格力兜兰种子非共生萌发的培养方法，其特征在于：步骤（2）中所述格力兜兰种子暗培养萌发的时间为54天。