[发明专利]一种巴戟天多糖提取物通过抑制睾丸血管生成有效治疗精索静脉曲张的方法

权利要求书

1.一种巴戟天多糖提取物通过抑制睾丸血管生成有效治疗精索静脉曲张的方法，其特征在于，其包括以下步骤：(1)、建立实验性精索静脉曲张动物模型；(2)、提取巴戟天粗多糖，初步纯化后，研究和探讨巴戟天粗多糖对实验性精索静脉曲张大鼠下丘脑-垂体-睾丸轴的修复作用，尤其是其在疾病早期和进展期的修复作用；(3)、结果表明：100mg/kg巴戟天粗多糖能够在精索静脉曲张早期修复双侧睾丸生精功能和附睾精子质量，其机制可能与抑制血管新生和维持间质正常代谢有关。

2.根据权利要求1所述的一种巴戟天多糖提取物通过抑制睾丸血管生成有效治疗精索静脉曲张的方法，其特征在于，所述的步骤1具体包括：(A)动物分组和给药方法；(B)巴戟天粗多糖的制备和纯化；(C)巴戟天多糖含量测定；(D)巴戟天粗多糖光谱分析；(E)巴戟天粗多糖同质性和分子量分析；(F)巴戟天粗多糖的单糖成分分析；(G) Turner法制作实验性精索静脉曲张大鼠模型；(H)精索静脉曲张大鼠模型鉴定；(I)大鼠性行为学检测；(J)精子分析；(K)大鼠心脏灌注，取材和冰冻切片；(L)睾丸凋亡检测；(M)睾丸免疫组织荧光染色；(N)免疫印迹实验；(O)统计学方法。

3.根据权利要求2所述的一种巴戟天多糖提取物通过抑制睾丸血管生成有效治疗精索静脉曲张的方法，其特征在于，所述的步骤(A)的具体方法如下：119只雄性SD大鼠按体重，以随机数字法，随机分为7组，每组17只，分别为假手术组，实验性精索静脉曲张模型组(以下简称曲张组)，溶剂对照组，25mg/kg巴戟天粗多糖治疗组(MOP25组)，50mg/kg巴戟天粗多糖治疗组(MOP50组)，100mg/kg巴戟天粗多糖治疗组(MOP100组)，200mg/kg巴戟天粗多糖治疗组(MOP200组)；除假手术组外，均进行实验性精索静脉曲张手术；术后动物单笼饲养休息3天；

于术后第4天，对实验动物给予巴戟天粗多糖药液治疗；假手术组和曲张组动物不给药；溶剂对照组动物给予双蒸水，1.5ml/天；余巴戟天粗多糖治疗组给予相应药量的巴戟天多糖药液(100mg/ml)，不足2ml的，以双蒸水补足至1.5ml；持续治疗4周，即28天。

4.根据权利要求2所述的一种巴戟天多糖提取物通过抑制睾丸血管生成有效治疗精索静脉曲张的方法，其特征在于，所述的步骤(B)的具体方法如下：

(1)巴戟天干燥根剪断，粉碎，烘干(45℃，24h)；

(2)加入3倍量95%乙醇，煮沸2h，弃上清；重复一次；

(3)自然挥发干燥，用6倍量双蒸水，煮沸2h，收集药液(上清)；重复两次；

(4)药液冷却至室温，以6层纱布过滤后，65℃旋转蒸发，得相对密度1.2g/ml的流浸膏；

(5)加入无水乙醇，使醇含量达到60%，4℃静置24h，收集沉淀；

(6)脱蛋白：沉淀以双蒸水溶解，取1/3体积Sevage试剂(氯仿：正丁醇=4:1)，二者混合加入分液漏斗，颠倒混匀5-8次，静置分层1h；去除下层的氯仿液和中层变性蛋白；重复此步骤4次；

(7)向已脱蛋白的粗多糖液中加入无水乙醇，使醇含量达到60%，4℃静置24h，收集沉淀；

(8)沉淀以无水乙醇，丙酮，乙醚分别洗涤一次，抽滤干燥，60℃干燥24h后，得巴戟天粗多糖粉末。