[发明专利]一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的方法

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的新方法。货架期主要与乙烯合成、乙烯信号传导和细胞壁降解等相关，现有技术虽有一些对相关目标操控基因的研究，但这些基因修饰后并未有效延缓果实的成熟和软化，或者虽能延缓果实的成熟和软化，但同时也影响果实的营养成分、活性成分等，不适于生产应用。本发明发现番茄的SlEB1基因与乙烯的合成及细胞壁降解密切相关，沉默该基因后，转基因生成的番茄货架期极显著延长，可实际应用于生产和生活中。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的方法。

背景技术

番茄是果实类蔬菜的代表。番茄果实色彩鲜艳、肉厚汁多、风味独特，且富含多种维生素、有机酸、氨基酸、矿物质和类黄酮等，不仅营养价值高，还具有抗氧化、助消化、降血脂和抑癌等诸多益处，故深受消费者喜爱。

全球每年番茄净产值超过500亿美元，但因番茄的货架期很短，每年超过总产量的25％都腐烂变质，经济损失巨大。番茄果实属呼吸跃变型果实，其特点是在果实成熟初期呼吸作用加强，大量合成乙烯，果实在短期内迅速过熟软化。软化后的果实在储藏和运输过程中极易损伤，进而被腐败微生物侵染，腐烂变质。因此，如何延长番茄果实货架期一直是农业和食品领域的重要研究方向。

目前，国内外延长番茄果实货架期的方法大致可分为物理方法、化学方法和生物学方法。物理方法指借助特定的设备，控制储藏环境的温度或气体，以降低果实的呼吸和代谢速率而延缓果实过熟软化，或者直接杀灭储藏环境中和果实表面的微生物以减少果实的腐烂。化学方法指对果实喷施或涂抹化学药物，以延缓果实过熟软化或杀灭果实表面的微生物而减少果实的腐烂。物理方法和化学方法都能有效延长番茄果实的货架期，但是成本高，或有化学残留，易影响番茄的风味。生物学方法主要指利用基因工程技术修饰番茄果实过熟软化的有关基因，延缓果实过熟软化过程，或增强果实对微生物的抗性。利用生物学方法一旦育成品种，无需借助特殊的设备或使用化学药物即可延长番茄果实货架期，成本低廉且安全性好，是公认的延长番茄果实货架期最理想的方法。

生物学方法的难点和关键在于研究并找到调控番茄果实成熟软化或微生物抗性的合适的基因，利用基因工程技术修饰这些基因后既要能延长果实货架期，又不影响果实的营养成分、活性成分和风味等。目前基因工程的目标操控基因主要包括乙烯合成、乙烯信号传导和细胞壁降解的相关基因，这些基因中，有些基因修饰后并没有明显地延缓果实的成熟和软化，有些基因修饰后虽能有效延缓果实的成熟和软化，但同时也影响果实的营养成分、活性成分和风味等，并不适合生产应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的新方法。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的新方法，所述基因工程技术中，选择的基因为番茄的SlEB1基因。

优选的，所述SlEB1基因包括SlEB1a基因和SlEB1b基因；所述SlEB1a的DNA序列如SEQ ID NO 1所示；所述SlEB1b的DNA序列如SEQ ID NO 2所示。

相应的，所述的利用基因工程技术延长番茄果实货架期的新方法，其具体步骤为：

(1)构建同时沉默SlEB1a基因和SlEB1b基因的RNAi载体：pBI121:SlEB1a/SlEB1bRi；

(2)用所述RNAi载体pBI121:SlEB1a/SlEB1bRi转化农杆菌；

(3)用农杆菌介导的遗传转化法转化番茄种子，常规种植后得到货架期延长的转基因番茄。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供了一种利用基因工程技术延长番茄果实货架期的新方法，对番茄保存具有极大的应用价值；