[发明专利]一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）选取自然发病、呼吸道症状明显且经检测为金黄色葡萄球菌感染死亡或濒临死亡的患兔，无菌采集病变组织，制成组织匀浆并过滤，获得滤液，现用；

（2）病原增殖

将步骤（1）所述滤液接种健康兔使其感染金黄色葡萄球菌，采集感染兔的相关组织，现用或 -20℃ 冷冻保存；

（3）抗原液制备

将步骤 （2）所述新鲜或冷冻的相关组织剔除脂肪和结缔组织，剪成小块，加入 4℃ 预冷的灭菌生理盐水，制成组织匀浆；组织匀浆连续冻融三次，释放抗原；将处理的组织匀浆过滤，获得的滤液置于 4℃，除去油脂，再离心除去沉淀，获得抗原液；

（4） 抗原液灭活

向步骤 （3）所得抗原液加入甲醛，使抗原液与甲醛达到体积比为 0.4% 的灭活浓度，4℃ 灭活 72h，获得灭活抗原液；

（5） 疫苗配置

将步骤（4）所得灭活抗原液和氢氧化铝佐剂按体积比为 1:1 混合，获得兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗；

（6） 疫苗分装

将步骤（5）所得组织灭活疫苗分装，冷藏保存。

2.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤 （1）中，所述呼吸道症状为咳嗽、喷嚏、鼻腔流出浆液性分泌物、鼻腔流出脓性分泌物的一种或几种。

3.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤（1）中，所述病变组织为气管、肺脏、肝脏的一种或几种。

4.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤（2）中，健康兔为精神状态良好、食欲正常、抗金黄色葡萄球菌抗体阴性的一种或几种。

5.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤 （2）中，相关组织为感染兔的气管、肺脏、肝脏、脾脏、淋巴结的一种或几种。

6.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤 （3）中，所述过滤为采用两层灭菌纱布在无菌条件下过滤。

7.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗的制备方法，其特征在于，步骤 （3）中，所述离心为 4℃，2000rpm，离心1h。

8.根据权利要求 1 所述一种兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗，其特征在于，步骤 （6）中，冷藏保存温度为 2℃～8℃。

9.一种如权利要求 1 至 8 任一项所述的制备方法制备出的兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗。

10.一种如权利要求 9 所述的兔金黄色葡萄球菌性肺炎组织灭活疫苗在兔养殖过程中的应用。