[发明专利]芋螺毒素多肽CTx-btg01及其制备方法和应用在审
申请号: | 201711384611.0 | 申请日: | 2017-12-20 |
公开(公告)号: | CN109942691A | 公开(公告)日: | 2019-06-28 |
发明(设计)人: | 高炳淼;石琼;彭超;张俊清;易云海;卞超 | 申请(专利权)人: | 海南医学院;深圳华大海洋科技有限公司;深圳市华大海洋研究院 |
主分类号: | C07K14/435 | 分类号: | C07K14/435;C07K1/14;C12N15/12;A01N37/46;A01P7/04 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 赵天月 |
地址: | 571199 *** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芋螺毒素 多肽 制备方法和应用 哺乳动物毒性 氨基酸组成 杀虫剂领域 生物杀虫剂 特异性作用 多肽蛋白 高效安全 抗虫活性 药物活性 重要应用 氨基酸 制备 昆虫 开发 | ||
1.一种芋螺毒素多肽,其特征在于,所述芋螺毒素多肽由17个氨基酸组成,所述芋螺毒素多肽的氨基酸全长序列为GGCCSHPACGVNHPELC;
任选地,所述芋螺毒素多肽从左边数,第3个氨基酸和第9个氨基酸之间、第4个氨基酸和第17个氨基酸之间分别形成二硫键。
2.一种DNA序列,其特征在于,所述DNA序列编码权利要求1所述的芋螺毒素多肽。
3.权利要求1所述的芋螺毒素多肽在药物制备领域中的用途,所述药物包括用于杀虫的药物;
任选地,所述药物包括生物杀虫剂;
任选地,所述药物包括昆虫杀虫剂。
4.一种杀虫药物,其特征在于,所述杀虫药物以权利要求1所述的芋螺毒素多肽作为药物活性中心,
所述杀虫药物还包括药学上可用的赋形剂或者药用辅料。
5.根据权利要求4所述的杀虫药物,其特征在于,所述杀虫药物的剂型包括选自粉剂、溶液剂、丸剂或膏剂中的至少一种;
任选地,所述杀虫药物制备成独立的试剂单元,所述试剂单元的浓度至少为0.16nM。
6.一种药物组合物,其特征在于,所述药物组合物包括权利要求1所述的芋螺毒素多肽。
7.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的芋螺毒素多肽;
任选地,所述试剂盒包括独立的试剂单元,所述试剂单元包括所述芋螺毒素多肽,所述试剂单元中芋螺毒素多肽的浓度至少为0.16nM。
8.权利要求1所述的芋螺毒素多肽的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:
芋螺毒素多肽的提取和富集;
芋螺毒素多肽的分离、质谱测序以及序列选取;
固相合成法合成多肽及合成多肽的复性。
9.根据权利要求8所述的制备方法,其特征在于,所述芋螺毒素多肽的提取包括:
从桶形芋螺中取出毒管,置于多肽提取液中,混合离心分离,取上清液冷冻抽干,其中,所述多肽提取液包括20~40体积%乙腈和0.1~0.5体积%的三氟乙酸,以及蛋白酶抑制剂。
10.根据权利要求8或9所述的制备方法,其特征在于,所述芋螺毒素多肽的分离、质谱测序以及序列选取包括:将富集得到的芋螺毒素多肽采用强阳离子交换高效液相色谱进行分离,再采用高效液相色谱-质谱联用仪进行多肽质谱检测,根据质谱检测产生的质谱数据进行数据解析和生物信息分析,得到芋螺毒素多肽完整的氨基酸序列;
任选地,所述固相合成法合成多肽及合成多肽的复性包括:化学合成方法合成其全序列,合成后多肽使用ESI-MS进行分子量确定,然后将合成的多肽进行复性,恢复天然起活性作用的结构,复性的多肽进行复性效率检测,然后进一步纯化复性后的多肽。
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