[发明专利]一种检测阴虚上火体质中血清特异蛋白的试剂盒及其应用

说明书

本发明公开了一种检测阴虚上火体质中血清特异蛋白的试剂盒，属于血清生物学标志物领域。所述试剂盒包括包被抗补体蛋白C9抗体的酶标板、包被抗血清白蛋白抗体的酶标板、补体蛋白C9的蛋白标准品、血清白蛋白的蛋白标准品、补体蛋白C9的生物素标记抗体、血清白蛋白的生物素标记抗体。该试剂盒采用补体蛋白C9和血清白蛋白作为诊断标志物，并通过测定补体蛋白C9和血清白蛋白的浓度，鉴别阴虚上火体质，将中医证候的诊断与系统生物学有机结合，为现代生物学解释中医的阴虚上火提供了实验依据，从而反映阴虚上火的生物学基础；并且该试剂盒诊断的敏感度达到81.2％、特异性达到92.3％，具有较高的准确性，操作简便。

技术领域

本发明涉及血清生物学标志物领域，具体涉及一种检测阴虚上火体质中血清特异蛋白的试剂盒及其应用。

背景技术

阴虚上火是一种常见的亚健康状态，在人群中十分常见，易发口疮，起病较快，表现为口内灼热疼痛、口干乏力、口腔黏膜出现圆形或椭圆形溃疡、周围轻微充血、舌红少苔、脉细弦数，愈后常易复发。目前，临床判断阴虚上火的主要方法是通过问诊并且观察舌象、脉象进行，缺乏量化的诊断指标。

系统生物学的特点是整体性、时效性，与中医学整体观念、辩证施治的思想较为一致，系统生物学技术的发展为中医学中复杂生命现象的研究提供了可行条件。蛋白质组学是一门大规模、高通量、系统化的研究某一类型细胞、体液、组织中所有蛋白的组成及功能的学科，从分子生物学角度研究机体在蛋白质水平的动态及整体性，同中医的整体、动态观具有一致性。可以通过筛选并鉴定与阴虚上火体质相关的血清特异蛋白，对阴虚上火的本质作出全面解释。

因此，研究一种能够检测与阴虚上火体质相关的血清特异蛋白的试剂盒具有重要意义。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提出一种检测阴虚上火体质中血清特异蛋白的试剂盒及其应用，该试剂盒能够代替传统的中医诊断方法，将中医和系统生物学有机结合，为现代生物学解释中医的阴虚上火提供了实验依据，从而反映阴虚上火的生物学基础，并且达到诊断的标准化，具有灵敏度高、特异性高的特点。

基于上述目的，本发明提供的一种检测阴虚上火体质中血清特异蛋白的试剂盒，所述试剂盒包括包被抗补体蛋白C9抗体的酶标板、包被抗血清白蛋白抗体的酶标板、补体蛋白C9的蛋白标准品、血清白蛋白的蛋白标准品、补体蛋白C9的生物素标记抗体、血清白蛋白的生物素标记抗体。

本发明中，所述包被抗补体蛋白C9抗体的酶标板购自Abcam公司，其型号为ab137912；包被抗血清白蛋白抗体的酶标板购自Raybiotech公司，其型号为ELH-Albumin-1；补体蛋白C9的蛋白标准品购自Abcam公司，型号为GR262750-8；血清白蛋白的蛋白标准品购自Raybiotech公司，型号为GO3101788；补体蛋白C9的生物素标记抗体购自Abcam公司，型号为GR2627504；血清白蛋白的生物素标记抗体购自Raybiotech公司，型号为ELH-Albumin-1。

本发明筛选出2个血清特异蛋白作为阴虚上火体质人群判定的生物学标志物，这2个血清特异蛋白在阴虚上火体质人群、平和体质人群血清中有显著性差异表达，补体蛋白C9和血清白蛋白在阴虚上火体质人群血清中的浓度均低于在平和体质人群血清中的浓度，因此，可将补体蛋白C9和血清白蛋白作为阴虚上火体质判定的生物学标志物；代替传统的问诊、观察舌象脉象来鉴别阴虚上火体质，增加中医证候诊断的科学性，并具有较高的敏感性和特异性。

优选地，所述补体蛋白C9的蛋白标准品的浓度为15ng/ml，所述血清白蛋白的蛋白标准品的浓度为1200ng/ml。

优选地，所述试剂盒还包括补体蛋白C9的辣根过氧化物酶标记亲和素、血清白蛋白的辣根过氧化物酶标记亲和素、稀释液、洗涤液、底物溶液和终止液。