[发明专利]磷酸化TP2多糖及其制备方法和应用有效
申请号: | 201711297565.0 | 申请日: | 2017-12-08 |
公开(公告)号: | CN109897117B | 公开(公告)日: | 2021-08-06 |
发明(设计)人: | 李平;智发朝;王晔;刘洋洋;王从峰;白杨;邝高波 | 申请(专利权)人: | 广州知易生物科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;A61K31/715;A61P1/00 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 万志香 |
地址: | 510663 广东省广州市广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 磷酸化 tp2 多糖 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种磷酸化TP2多糖的制备方法,其特征是,包括以下步骤:
(1)磷酸化试剂的制备:将三聚磷酸钠和三偏磷酸钠以质量比5 : 1混合,用水溶解,配置磷酸化试剂,磷酸化试剂的浓度为0.1g/mL;
(2)TP2多糖的制备:对脆弱拟杆菌的菌泥进行热水浸提,超滤浓缩,酸解,超滤除盐,柱层析,冷冻干燥,得到TP2多糖;
(3)在磷酸化试剂中加入冻干的TP2多糖,溶解得溶液,溶液中的所述TP2多糖浓度为0.01~0.02g/mL;
(4)调节溶液的pH值为8.0~9.0,进行反应后,取出,冷却至室温;
(5)往溶液中缓慢加入3~4倍95%的乙醇溶液,静置;离心,取沉淀,置于50±3℃的环境下2~3h,以去除残留的乙醇,冷冻干燥;往冷冻干燥后得到的多糖中加入超纯水,复溶,透析,冷冻干燥得到磷酸化TP2多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征是,所述脆弱拟杆菌为保藏编号为CGMCCNo. 10685的脆弱拟杆菌ZY-312。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征是,所述反应的条件为:置于80~85℃环境下,反应5~6h。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征是,步骤(5)中,在50~60℃的环境下复溶,转移至截留分子量为10000~14000D的透析袋中透析48±2h,冷冻干燥得到磷酸化TP2多糖。
5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征是,步骤(2)中,取所述CGMCC No. 10685的脆弱拟杆菌ZY-312的菌泥,加入超纯水,混合均匀,搅拌提取,常温离心,取上清液,加入冰乙酸,沸腾状态下反应2-4h,冷却至室温,调节反应液的pH至中性,超滤膜超滤除盐,DEAESepharose Fast Flow柱层析,pH8.5,20mM Tris-HCl溶液洗脱,收集吸收峰对应洗脱液,超滤膜超滤除盐,冷冻干燥,得到所述TP2多糖。
6.根据权利要求1-5任一项所述的制备方法得到的磷酸化TP2多糖。
7.根据权利要求6所述的磷酸化TP2多糖,其特征是,所述磷酸化TP2多糖磷酸根接枝量为4~6%。
8.权利要求6或7所述的磷酸化TP2多糖在制备防治炎性肠病的药物中的应用。
9.一种防治炎性肠病的药物,其特征是,其活性成分包括有权利要求6或7所述的磷酸化TP2多糖。
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