[发明专利]一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及重组柯萨奇病毒技术领域，尤其涉及一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法。

背景技术

重组柯萨奇病毒B3用于对人体进行治疗，然而现有技术中，重组柯萨奇病毒B3还没有正常的检测工序，容易造成检测数据的差异，使得人们在使用时的安全性降低。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的检测数据的差异的缺点，而提出的一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

设计一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法，包括以下步骤：

S1、实验对象选取，选取多个实验小鼠并进行编号，在实验前的12个小时内禁止喂食小鼠；

S2、病毒注射，在S1的小鼠处理完成后，对小鼠注射2-10mg的重组柯萨奇病毒B3注射液，注射完成后的30-60min，检测并记录小鼠的致敏临床症状，使小鼠处于致敏状态；

S3、临床症状判断，在S2处理完成后20-50个小时后，观察小鼠是否出现呼吸急促、身体颤抖或嘴唇处是否出现皮疹、水泡的症状；

S4、病毒检测，若小鼠出现S3中的症状，则将出现症状的小鼠致死，用多个试管存放不同编号致死小鼠的血清并对试管进行编号；

S5、血清检测，将每个编号的试管内血清分别放入多个的培养皿内并对多个培养皿进行编号，在每个编号的培养皿内倒入2-5ml的稀释缓冲液，在每个培养皿内的血清被稀释后，接着倒入3-8ml的洗涤缓冲液，在每个培养皿内加入氧化物酶标记物，用于检测血清细胞中的IgM含量；

S6、病毒评估，若S5中IgM含量的含量相对于正常值较高，则说明该血清内重组柯萨奇病毒B3对小鼠造成影响，使得小鼠过敏。

优选的，所述稀释缓冲液的是由小鼠血清与洗涤缓冲溶液配置而成，且小鼠血清和洗涤缓冲溶液的比列为3:4。

优选的，所述洗涤缓冲液为PH7.4磷酸盐缓冲溶液。

本发明提出的一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法，有益效果在于：本发明通过对小鼠血清内的IgM进行标记＝，从而方便对人们对IgM的含量进行观察，而IgM用于对重组柯萨奇病毒B3进行检测，便于重组柯萨奇病毒B3的检测和评估。

具体实施方式

对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。

实施例一

设计一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法，包括以下步骤：

S1、实验对象选取，选取多个实验小鼠并进行编号，在实验前的12个小时内禁止喂食小鼠；

S2、病毒注射，在S1的小鼠处理完成后，对小鼠注射2mg的重组柯萨奇病毒B3注射液，注射完成后的30min，检测并记录小鼠的致敏临床症状，使小鼠处于致敏状态；

S3、临床症状判断，在S2处理完成后20个小时后，观察小鼠是否出现呼吸急促、身体颤抖或嘴唇处是否出现皮疹、水泡的症状；

S4、病毒检测，若小鼠出现S3中的症状，则将出现症状的小鼠致死，用多个试管存放不同编号致死小鼠的血清并对试管进行编号；

S5、血清检测，将每个编号的试管内血清分别放入多个的培养皿内并对多个培养皿进行编号，在每个编号的培养皿内倒入2ml的稀释缓冲液，在每个培养皿内的血清被稀释后，接着倒入3ml的洗涤缓冲液，在每个培养皿内加入氧化物酶标记物，用于检测血清细胞中的IgM含量，稀释缓冲液的是由小鼠血清与洗涤缓冲溶液配置而成，且小鼠血清和洗涤缓冲溶液的比列为3:4，洗涤缓冲液为PH7.4磷酸盐缓冲溶液。

S6、病毒评估，若S5中IgM含量的含量相对于正常值较高，则说明该血清内重组柯萨奇病毒B3对小鼠造成影响，使得小鼠过敏。

实施例二

设计一种重组柯萨奇病毒B3注射液致敏性的检测评价方法，包括以下步骤：

S1、实验对象选取，选取多个实验小鼠并进行编号，在实验前的12个小时内禁止喂食小鼠；

S2、病毒注射，在S1的小鼠处理完成后，对小鼠注射5mg的重组柯萨奇病毒B3注射液，注射完成后的40min，检测并记录小鼠的致敏临床症状，使小鼠处于致敏状态；

S3、临床症状判断，在S2处理完成后35个小时后，观察小鼠是否出现呼吸急促、身体颤抖或嘴唇处是否出现皮疹、水泡的症状；

S4、病毒检测，若小鼠出现S3中的症状，则将出现症状的小鼠致死，用多个试管存放不同编号致死小鼠的血清并对试管进行编号；