[发明专利]一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗，其特征在于，包括体积比为1：50的3型鸭甲肝病毒抗原与鸭卵黄抗体组成的抗原抗体复合物，所述鸭卵黄抗体为经灭活的3型鸭甲肝病毒抗原免疫后的高免鸭蛋中提取获得的，所述3型鸭甲肝病毒为3型鸭甲肝病毒SD15株，生物保藏编号为CGMCC No.14739。

2.根据权利要求1所述的一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗，其特征在于，所述3型鸭甲肝病毒抗原中含有0.4-0.5％质量比硫酸镁、0.1-0.25％质量比氯化钠和0.2-0.5％质量比蜂胶，效价范围为10^6.0ELD₅₀/0.2ml-10^7.0ELD₅₀/0.2ml。

3.一种如权利要求1-2所述的鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备3型鸭甲肝病毒抗原

利用3型鸭甲肝病毒免疫尿囊接种鸭胚，置于37℃下孵育，收集接种后24-96小时内死亡的鸭胚，置于-20℃冷冻处理0.5-1h，分别收取尿囊液和胚体；将胚体去掉头和四肢后，进行充分匀浆，离心取上清与尿囊液混合，经0.22微米滤膜进行过滤后，加入0.4-0.5％质量比硫酸镁、0.1-0.25％质量比氯化钠和0.2-0.5％质量比蜂胶，混匀，获得3型鸭甲肝病毒抗原；

(2)制备卵黄抗体

将步骤(1)制备的抗原灭活后免疫产蛋鸭，收集抗体效价为1：64以上的高免鸭蛋，在无菌条件下，取蛋黄与生理盐水按照1：5体积比混合，搅匀过滤后，向滤液中依次加入40％体积比的甲醛溶液、青霉素溶液、链霉素溶液，使其终体积浓度分别为0.1％(v/v)、2000-3000IU/mL、2000-3000IU/mL，混匀，置于37℃下反应1h，获得卵黄抗体；

(3)制备疫苗

将步骤(1)的抗原与步骤(2)的卵黄抗体按照体积比1：50混合，置于37℃孵育1-2h，获得疫苗。

4.根据权利要求3所述的一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，将去掉头和四肢的胚体充分匀浆后，经反复冻融3次后再离心。

5.根据权利要求3所述的一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，抗原灭活的方法为：在抗原中加入终浓度为0.1％体积比的甲醛，37℃下处理40h以上。

6.根据权利要求3所述的一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，免疫产蛋鸭的方法为：采用颈部皮下注射方式，1ml/只；1周后进行一次强化免疫，颈部皮下注射，1.5ml/只；2周后，再进行一次强化免疫，颈部皮下注射，2ml/只；之后每隔2月进行一次免疫，颈部皮下注射，1ml/只。

7.根据权利要求3所述的一种鸭甲肝病毒抗原抗体复合物疫苗的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，蛋黄与生理盐水溶液混合，依次经50目、100目滤膜负压抽滤后，再与甲醛和抗生素溶液混合。