[发明专利]一种微胶囊微生物型时间温度指示器及其制备方法

权利要求书

1.一种微胶囊微生物型时间温度指示器的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)使用SPG技术，包裹Weissella cibaria CIFP 009菌，制作W/O乳液；

(2)在生物洁净工作台中，将制作完毕的W/O乳液倾入浓度为0.1N的氯化钙溶液中，对微胶囊进行固定；

(3)在生物洁净工作台中，将混合液倒入1L容量的分液漏斗中，密封后移入震荡机震荡10分钟，而后静置分离，将由下层得到的微胶囊使用经过杀菌的蒸馏水进行清洗5-6次后，于4℃进行保存；

(4)制作微生物型TTI时，在生物洁净工作台中，使用0.1N的氢氧化钠将基质的pH调整至7.0，而后将保存的微胶囊按w:v为1:2的比例移入营养基质；

(5)在生物洁净工作台中，将微生物型TTI充分混合，移入提前经过紫外线杀菌的定制容器中，并将整个TTI系统密封，微生物型TTI即制作完成。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)的微生物W/O乳液的制备步骤如下：

在生物洁净工作台中将经过灭菌的SPG膜缓缓放入连续相石蜡油中，密封后用超声波处理30分钟，保证充分浸润；

将Weissella cibaria CIFP 009菌细胞悬液5ml移入保持在35℃的海藻酸钠溶液中，充分均匀混合后放入SPG机器的分散相罐中；

将经超声波处理的膜安装到SPG设备上，后将石蜡油倒入连续相罐中；

将SPG设备的搅拌器调至60rpm/min，氮气压强调至15kPa，而后开始乳化作业；

乳化结束后在低速下再搅拌30分钟，稳定生成的W/O乳液。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)的营养基质为以水为溶剂，分别加入MRS琼脂培养基、终浓度为4％w/v的葡萄糖、终浓度为15％w/v的甘油以及终浓度为10％v/v的指示剂；其中指示剂由终浓度分别为0.04％w/v的溴甲酚紫、0.05％w/v的溴甲酚绿与0.1％w/v的甲基橙溶解于95％v/v的乙醇溶液中制得。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)的定制容器，底面为PVC贴纸，使用时直接撕下粘贴在指示食品上；其容器为特殊形状的双面胶，中央有20mm×20mm的空间穿孔，贴在PVC贴纸上后形成可容纳微生物型TTI的空间；微生物型TTI制作完毕后使用LDPE塑料薄膜密封整个微生物型TTI系统。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述Weissella cibaria CIFP 009菌来自于the Center for Intelligent Agro-Food Packaging，Seoul，Korea。