[发明专利]一种检测多种维生素制剂中维生素B12有关物质的方法

说明书

技术领域

本发明涉及药物分析领域中一种检测多种维生素制剂中维生素B₂有关物质的方法。

背景技术

维生素B₁₂(VitaminB₁₂)又称钴胺素或氰钴素，它是一种含3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环(与卟啉相似)，是维生素B₁₂分子的核心，含这种环的化合物都被称为类咕啉，也是唯一含金属元素的维生素。维生素B₁₂为浅红色的针状结晶，易溶于水和乙醇，在pH值4.5～5.0弱酸条件下最稳定，强酸(pH<2)或碱性溶液中分解，遇热可有一定程度破坏，但短时间的高温消毒损失较小，遇强光或紫外线易被破坏。自然界中的维生素B₁₂都是微生物合成的，高等动植物不能制造维生素B₁₂。维生素B₁₂的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血；防止大脑神经受到破坏。

鉴于维生素B₁₂的重要作用，含维生素B₁₂的制剂的质量至关重要，经查阅国内外药典及文献，CP2015、EP8.0及BP2013中维生素B₁₂原料标准只对其总杂进行了控制，均未收载维生素B₁₂制剂中有关物质。而多种维生素组成的复方胶囊制剂，成份复杂，目前尚未有多种维生素制剂中关于维生素B₁₂有关物质测定的报道，本发明对维生素B₁₂的杂质进行了全方位的研究，对多种维生素制剂中维生素B₁₂的单杂和总杂分别进行了控制，填补了多种维生素组成的复方制剂中维生素B₁₂有关物质检测方法的空白，更加严格控制了产品质量，保证用药安全。

本方法专属性、重现性良好，能够快速有效的分离测定出多种维生素制剂中维生素B₁₂的有关物质，可有效控制多种维生素制剂的质量和疗效。

发明内容

本发明的目的在于提供一种简便易行、灵敏度高、重现性好的多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质的检测方法。所述方法包括：

将含维生素B₁₂的多种维生素制剂经过前处理配制成检测溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱，采用磷酸氢二钠溶液流动相A、甲醇为流动相B，记录色谱图。

优选的，取本品内容物适量，加三氯甲烷5～50ml振摇使分散，加水萃取3次，合并层溶液，再用适量三氯甲烷清洗，加水稀释至每毫升溶液中约含维生素B₁₂为10～100μg的溶液，离心，上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，稀释50倍后作为对照溶液。

优选的，所述供试品溶液制备中的萃取剂为水；对照品溶液制备中的稀释剂为水。

优选的，所述流动相为磷酸氢二钠溶液(流动相A)、甲醇(流动相B)。

优选的，所述柱温为20～50℃。

优选的，所述流动相的流速为0.5～2.0mL/min。

优选的，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶。

优选的，所述检测波长为300～400nm。

本发明的要点在于我们采用HPLC法高效快速测定多种维生素制剂中维生素B₁₂的有关物质。本方法专属性强，重现性好、灵敏度高，且检测成本低、可广泛地应用于药物分析领域中，从而更好地确保含维生素B₁₂的多种维生素制剂的质量及有效性。

附图说明

图1：实施例1中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定的阴性样品图谱

图2：实施例1中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定的对照溶液图谱

图3：实施例1中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定的供试品图谱

图4：实施例2中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定的系统适用性图谱

图5：实施例3中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定图谱

图6：实施例4中多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质测定图谱

具体实施方式