[发明专利]一种检测多种维生素制剂中维生素B12有关物质的方法

权利要求书

1.一种检测多种维生素制剂中维生素B₁₂有关物质的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

色谱条件：以AQ-C₁₈为色谱柱；以0.020～0.026mol/L磷酸氢二钠溶液(磷酸调pH3.5)为流动相A，以甲醇为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长：300～400nm；柱温：20～50℃；流速：0.5～2.0mL/min；进样量：300～700μl，运行时间100～200分钟。

样品溶液的配制：取本品内容物适量，加有机溶剂5～50ml振摇使分散，萃取剂萃取3次，合并水层溶液，再用适量有机溶剂清洗，加水稀释至每毫升溶液中约含维生素B₁₂为0.5～100μg的溶液，离心，上清液滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取供试品溶液，稀释后作为对照溶液。测定：将供试品溶液和对照溶液分别注入液相色谱仪，记录色谱图测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，其粒度为3μm、5μm、7μm或10μm；其内径为2～5mm；其长度为10～30cm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述磷酸氢二钠溶液为流动相A、甲醇为流动相B；所述磷酸氢二钠溶液用磷酸调节pH为2.0～5.0。

4.根据权利要求1所述的供试品溶液的制备，其特征在于，所述有机溶剂为三氯甲烷，所述萃取剂为水。

5.根据权利要求1所述的供试品溶液的制备，其特征在于，所述实验中离心的转速为每分钟2000～4000转，时间为5～20分钟。

6.根据权利要求1所述的对照品溶液的制备，其特征在于，所述对照溶液为供试品的用水稀释50倍所得。