[发明专利]一种环烯醚萜苷的提取方法

说明书

技术领域

本发明属于中药物质提取技术领域，特别涉及一种山大颜环烯醚萜苷的提取方法。

背景技术

山大颜为茜草科九节属植物九节的干燥根，根叶药用，有清热解毒、消肿拔毒、祛风除湿之效，该植物成分对KB细胞还有显著的细胞毒作用。山大颜中所含活性提取物总环烯醚萜苷等具有抗老年痴呆的作用，现有技术中山大颜中活性的提取多为醇提回流法，总环烯醚萜苷提取率较低，仅为18%左右，使得主要药效物质利用率低。

发明专利CN201210214331.6，山大颜提取物及其制备方法与抗肿瘤应用，公开了一种山大颜提取物及其制备方法与抗肿瘤应用。山大颜提取物由如下方法制备而成：将山大颜经乙醇或甲醇加热回流或渗滤提取，减压浓缩得到浸膏，浸膏加水搅拌，依次用石油醚、乙醚提出低极性成分，正丁醇萃取，正丁醇部位大孔树脂富集，乙醇/水洗脱，产物在经甲醇/水反相ODS洗脱分离纯化、重结晶后得到山大颜提取物。本发明的山大颜提取物可用于制备治疗肿瘤的药物和保健品，其效部位成分明确，毒性小，药理作用强，具有良好的药用前景；制备工艺简单、易于大规模生产。

发明专利CN200510026144.5，一种用栀子果实制备总环烯醚萜苷的方法，包括如下步骤：(1)制备栀子果实粗提物：按常规将干燥栀子果实粗粉以水或乙醇水溶液浸泡或回流提取1～3次，过滤，将滤液减压浓缩至稀浸膏，再真空干燥得栀子果实粗提物；(2)纯化：将上述制得的栀子果实粗提物加适量水混悬后，过大孔吸附树脂，先用少量水洗脱至洗脱液不浑浊，弃去，再用10％~30％低浓度乙醇洗脱，收集洗脱液，减压浓缩干燥，得总环烯醚萜苷。该发明制备方法操作简单，成本低廉，产品纯度高、得率高，不污染环境，适于工业化生产。

现有技术中，对环烯醚萜苷的提取多集中于醇提和大孔吸附树脂富集，但提取率并不高。

发明内容

针对现有技术中对山大颜环烯醚萜苷提取率低的问题，本发明提供一种高效提取山大颜环烯醚萜的方法。

本发明通过以下技术方案实现：

一种环烯醚萜苷的提取方法，由以下步骤制备而得：

（1）取山大颜50~100份，粉碎成10~20目的粗粉，加水煎煮3次，煎煮液中预先加入山大颜粗粉质量20%~30%的介孔硅酸钙粉末，分别抽滤，合并滤液，浓缩含水量为20~30%，得到浓缩液Ⅰ；

（2）取浓缩液Ⅰ，加入10~15倍纯化水侵泡30~60min，回流提取2~3h，过滤，滤渣加6~8倍纯化水，按浓缩液加入纤维素酶3~6mg/ml，于恒温加热磁力搅拌器中45~55℃水浴酶解2~3h，酶解后过滤，滤渣加入6~8倍量纯化水，回流提取1~1.5h，提取液用纱布过滤，滤液以3000r/min离心20~30min，将上清液浓缩，制得样品液；

（3）取样品液，按照样品液：介孔碳=1g：（10~12g）于介孔碳吸附柱上样，上样后静态吸附1~2h，先用2~2.5BV蒸馏水洗脱除杂，再用体积分数15~20%的乙醇溶液洗脱，流速为1~1.2BV/h，收集洗脱液，浓缩，干燥，即可得到环烯醚萜苷粉末。

作为本发明的进一步改进，所述步骤（1）第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为1.0~2.0，加水量为药材量的10~12倍，煎煮时间为3.8~4.5h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.0~7.5，加水量为药材药材量的10~12倍，煎煮时间为1.8~2.4h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5~10.0，加水量为药材量的8~10倍，煎煮时间为1.8~2.4h。

作为本发明的进一步改进，所述步骤（4）第一次煎煮用水以1mol/L的盐酸调至pH为2.0~3.0，加水量为药材量的12~16倍，煎煮时间为1.8~2.2h；第二次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为7.5~8.0，加水量为药材药材量的12~16倍，煎煮时间为0.8~1.2h；第三次煎煮用水以饱和氢氧化钠调至pH为9.5~10.0，加水量为药材量的10~14倍，煎煮时间为0.8~1.2h。

煎煮法的高温在酸碱提取时，极容易引起中药成分的变化，影响中药成分的安全性和有效性，制约了热不稳定性药物在提取过程中的应用；介孔硅酸钙具有大比表面的吸附作用，在提取过程中，介孔能有效吸附中药成分，降低高温煎煮作用对中药活性成分的有害影响，同时介孔材料的大比表面积孔能更多的吸附山大颜提取液中的环烯醚萜苷，提高了山大颜中环烯醚萜苷的提取率和保持了其完整的物质活性。

作为本发明的进一步改进，所述介孔硅酸钙粉末制备方法如下：