[发明专利]基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器及其制备方法

权利要求书

1.一种基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)取石墨烯纳米材料分散于溶剂中，制成分散液备用；

(2)取L-赖氨酸氧化酶，在搅拌下加入磷酸缓冲液，得到混合液静置备用；

(3)取玻碳电极进行打磨和清洗；

(4)取步骤(2)所得混合液中的上层酶溶液加入到含有成膜剂的水溶液中，然后加入牛血清蛋白、辣根过氧化酶、步骤(1)所得分散液以及戊二醛溶液，搅拌均匀后，滴在步骤(3)所得的玻碳电极表面，再将玻碳电极冷冻干燥使其表面成膜，然后将所得修饰后的玻碳电极冰冻保存；

(5)取步骤(4)修饰后的玻碳电极作为工作电极、饱和甘汞电极作为参比电极、铂电极作为辅助电极，分别设置在电解池中形成三电极体系，制得基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器。

2.根据权利要求1所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：所述L-赖氨酸氧化酶是由莱茵海默氏菌、被囊假交替单胞菌、绿色木霉菌中的任意一种生产所得，或者是从长白山蝮蛇蛇毒、鲐鲅鱼黏液中的任意一种分离提纯所得。

3.根据权利要求1所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：所述石墨烯纳米材料为氨基修饰二茂铁/石墨烯氧化物纳米复合材料、氧化锡/石墨烯纳米复合材料、二氧化钛/石墨烯纳米复合材料、三氧化二铟立方体/石墨烯纳米复合材料、石墨烯纳米纤维、氟化石墨烯、氮掺杂石墨烯、硼掺杂石墨烯、石墨烯量子点中的任意一种或多种。

4.根据权利要求1-3任一项所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(1)为：取石墨烯纳米材料分散于N,N-二甲基甲酰胺溶剂中，超声分散20分钟，制成石墨烯纳米材料浓度为1mg/ml的分散液备用。

5.根据权利要求4所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，L-赖氨酸氧化酶与磷酸缓冲液的用量比例为1mg:(3.8～3.9)μl；所述磷酸缓冲液的pH值为7.2～7.4。

6.根据权利要求5所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(3)为：取一支玻碳电极，依次用4#、5#、6#的金相砂纸打磨，然后先后在1μm和0.3μm的氧化铝粉末上抛光，再将其放入丙酮中浸泡，取出后依次在乙醇和二次蒸馏水中超声洗涤各5分钟，再在浓度为1.0mM的铁氰化钾溶液中采用循环伏安法对该玻碳电极进行处理，处理后取出用二次蒸馏水清洗，然后自然干燥备用。

7.根据权利要求6所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(4)为：取步骤(2)所得混合液中的上层酶溶液25μl加入到45μl质量浓度为1-2％的成膜剂水溶液中，然后加入1.8mg牛血清蛋白、1mg辣根过氧化酶、10μl步骤(1)所得分散液以及10μl质量浓度为12.5％的戊二醛溶液，搅拌均匀后，滴在步骤(3)所得的玻碳电极表面，再将玻碳电极冷冻干燥使其表面成膜，然后将所得修饰后的玻碳电极冰冻保存。

8.根据权利要求7所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，所述电解池的规格为10ml，其装有2ml pH值为7～8的磷酸缓冲液作为测试底液。

9.权利要求1-8任一项所述的制备方法制得的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器。

10.权利要求9所述的基于石墨烯材料的L-赖氨酸电化学传感器在检测食品或药品中L-赖氨酸中的应用。