[发明专利]一种兰香子粗多糖的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种兰香子粗多糖的提取方法。

背景技术

兰香子，别名罗勒子，为唇形科植物罗勒的果实。干燥小坚果呈卵形，长约2毫米，基部有果柄痕迹；表面灰棕色至黑色，微带光泽，于扩大镜下可见细密小点。质坚硬，横切面呈三角形，子叶肥厚，乳白色，富油质。气弱，味淡，含口中有滑润感；浸水中，膨胀后，外表有1层白色粘液质。种子外面包裹的一层白色东西是一种叫做“粘多糖”的物质。果实的黏质中含戊糖9.2％，已糖70.3％，糖醛酸7.3％，游离的类脂25.4％，结合类脂10.3％。其黏多糖水解后产生D-半乳糖醛酸6.l％，D-甘露糖醛酸3.3％，D-葡萄糖醛酸25％，D-半乳糖 24.4％，D-甘露糖醛酸等。对兰香子的作用，《本草纲目》中记载“目翳及尘物入目，以三、五颗安目中，少顷当湿胀，与物俱出。”《保健药园》记载“治异常体液停留在眼内取适量罗勒子，研成粉末，与开水制成敷剂，外敷于眼部。”《普济方》记载“兰香子洗净晒干，每用一粒，以筋点眼眦头，闭目，须臾自随泪出，翳膜在上，如鱼眼然。再易一粒，以病退为度。或兰香子为细末，以黍米大，点眼眦头。”

多糖广泛分布于自然界的多种生物体中，是构成生命体的分子基础之一。它是由单糖聚合成的天然生物大分子，结构复杂，分子量大，极性大。随着人们对多糖研究的深入，越来越多的多糖被分离出来，并且发现这些多糖具有很多的生物学活性和多种药理活性，它不仅可以作为广谱免疫促进剂调节机体免疫功能，还可以在抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖、抗辐射等方面发挥广泛的药理作用。多糖因其来源广泛，药理活性强，细胞毒性低，安全性强，毒副作用较小，已引起医药界的广泛关注，并成为当今生命科学研究的热点之一。

迄今为止，已有300多种多糖类化合物从天然产物中分离出来，常用的提取方法有溶剂提取法、酶提取法、超声波提取法、微波提取法等。溶剂提取法是提取多糖的最常用的方法。常用的溶剂提取法有水提取、碱提取和酸提取。但多糖结构复杂，种类繁多，并且常与脂质和蛋白质结合成多糖复合物，这给植物多糖的提取和分析带来不少困难。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种超声-酶解相结合的方法提取兰香子中的粗多糖。

为实现上述发明目的，本发明采取以下技术方案：

一种兰香子粗多糖的提取方法，包括如下步骤：

(1)将兰香子洗净晒干，按照1:1-3的料液比加入小分子水，在匀浆机中打浆，将浆液放入超声水浴锅中，再加入小分子水超声浸提；

(2)离心，分离得上清液，将沉淀放至常温加入小分子水至料液比为1:50-60，再加入2-4％的复合酶溶液，调节pH至5-7进行酶解，然后升温至80-100℃灭菌，离心，分离得上清液；

(3)合并两步所得上清液，放至室温，加入无水乙醇，冷藏过夜后离心烘干，得兰香子粗多糖。

优选的，步骤(1)中两次加入小分子水的量的总和与兰香子的料液比为1:50-60。

优选的，步骤(1)所述超声浸提条件为：150-350W，70-90℃， 1-3h。

优选的，步骤(2)中采用磷酸二氢钾溶液进行所述pH的调节。

优选的，步骤(2)中进行所述酶解的温度为40-50℃，时间为 50-60min。

优选的，步骤(2)中所添加的复合酶为果胶酶、木瓜蛋北酶和木聚糖酶，其中三者的质量比为：果胶酶：木瓜蛋白酶：木聚糖酶＝5:1:2。

优选的，步骤(2)和(3)中所述离心条件为4000-5500r/min，离心时间为6--18min。

优选的，步骤(3)中加入无水乙醇的量为上清液的3-5倍。

超声波法提取多糖类化合物的主要原理是利用超声波的空化效应增加溶剂穿透力，提高活性成分溶出速度和溶出次数。

酶参与到植物多糖的提取分离过程中，主要是利用酶促反应，借助酶的参与来降低提取过程的活化能，使整个提取活动在较低能量水平上进行，易于多糖从植物细胞中释放出来。

果胶酶是指能够分解果胶质的多种酶的总称，主要存在于高等植物和微生物中，能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，有助于细胞内物质的流出。

木瓜蛋白酶又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶，在酸性、中性、碱性环境下均能分解蛋白质，对动植物蛋白、多肽、酯和酰胺等有较强的水解能力。木瓜蛋白酶能溶于水和甘油，几乎不溶于乙醇、氯仿和乙醚等有机溶剂。