[发明专利]一种氯丙嗪的磁免疫化学发光检测试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种氯丙嗪的磁免疫化学发光检测试剂盒，它包括：酶标抗原、酶标抗原稀释液、磁标抗体、磁标抗体稀释液、氯丙嗪系列标准品溶液、化学发光底物A液、化学发光底物B液、复溶液、洗涤液，其中酶标抗原是辣根过氧化物酶标记的氯丙嗪半抗原，磁标抗体是免疫磁珠标记的氯丙嗪单克隆抗体。本发明还公开了一种利用上述试剂盒配套化学发光检测仪检测动物组织和牛奶中氯丙嗪残留量的方法，本方法对氯丙嗪检测具有较高的灵敏度、特异性和较短的检测时间。

技术领域

本发明涉及一种化学发光检测试剂盒及其检测方法，特别是检测动物组织、牛奶等样品中氯丙嗪残留量的磁免疫化学发光检测试剂盒，属于免疫学检测领域。

背景技术

氯丙嗪(Chlorpromazine)系酚噻嗪类药物，为中枢多巴胺受体的阻断剂，作用于中枢神经系统，具有抗精神病、降温、镇吐、催眠、麻醉等多种药理作用。兽医临床上主要被用作镇静药。近年来，因受利益的驱使，有人在饲料、饮水中私自添加氯丙嗪，达到镇静、催眠之效果，从而间接起到催肥促生长的作用；或在运输过程中，为了减少途中失重和应激死亡，防止肉品质下降，常常大剂量使用氯丙嗪，尤其是在屠宰前，大量使用氯丙嗪，可造成氯丙嗪在畜禽产品中残留。

氯丙嗪在体内主要通过肝脏代谢，大部分从尿中排除，但因排法缓慢，易产生体内蓄积残留，在动物组织中残留可达数月之久。动物组织中残留的氯丙嗪通过食物链进入人体内，能引起白细胞减少和粒细胞缺乏症以及其它的一些不良反应，直接影响人们的身体健康。同时，因残留超标影响产品出口，也给养殖业带来巨大的经济损失。因此，欧盟早在1997年就明令禁止氯丙嗪在饲料中添加(EC)NO.17/97；我国农业部第176号公告(2002年)也明确指出：严禁氯丙嗪在动物饲料和饮水中添加；农业部第235号公告(2002年)又指出：允许氯丙嗪的治疗作用，但在动物产品中不得检出。

由于经济利益的驱使，非法滥用氯丙嗪的现象屡禁不止，经典的色谱方法已不能满足现场大量样品的快速检测需要，因此亟需便携、高灵敏度的快速检测产品的出现。免疫检测方法是以抗原、抗体的特异性反应为基本原理建立起来的快速分析方法，由于抗原、抗体的结合具有高选择性和灵敏性，使得这一技术在药物残留检测领域得到广泛的应用。目前，最常用的免疫检测方法包括酶联免疫检测法和胶体金免疫层析检测法，但由于灵敏度较低，假阴性率和假阳性率较高，逐渐被灵敏度高、准确度高、检测时间短的化学发光免疫检测方法所替代。磁免疫化学发光检测试剂配套磁免疫化学发光检测仪检测动物源性产品中氯丙嗪的残留，实现检测过程的全自动化，减少人为操作误差，灵敏度高，准确度高，检测成本低，适用于大批量样品中氯丙嗪残留量的筛查。

发明内容

本发明的目的在于提供一种氯丙嗪检测试剂盒，采用该试剂盒进行氯丙嗪残留量检测时，具有较高的灵敏度、特异性和准确度。

本发明的另一个目的在于提供一种检测氯丙嗪的方法，采用试剂盒配套化学发光检测仪进行氯丙嗪残留量检测时，不仅具有较高的灵敏度、特异性和准确度，而且实现了全自动化检测，缩短检测时间，减少人为操作误差。

本发明试剂盒，它包括：酶标抗原、酶标抗原稀释液、磁标抗体、磁标抗体稀释液、氯丙嗪系列标准品溶液、化学发光底物A液、化学发光底物B液、复溶液、洗涤液。

所述酶标抗原是辣根过氧化物酶标记的氯丙嗪半抗原，所述磁标抗体是免疫磁珠标记的氯丙嗪单克隆抗体，所述氯丙嗪单克隆抗体是由氯丙嗪半抗原与牛血清白蛋白偶联得到的偶联物作为免疫原免疫动物制备获得；所述氯丙嗪半抗原是由N1-(5-氯-2-碘苯)-N3化合物与3-溴-2-硫代苯酚反应得到中间体羟基氯丙嗪后，再与碘乙醛反应得到，其分子结构式为：

所述免疫磁珠表面含有—OH、—COOH或—NH₂活性基团。