[发明专利]一种环金属铂配合物及其制备方法与作为蛋白染色剂的应用

说明书

本发明公开了一种环金属铂配合物及其制备方法与作为蛋白染色剂的应用，环金属铂配合物包括C^N二齿配体和/或O^O二齿配体结构，其属于发光金属配合物，制备方法简单，具有较高的量子效率；作为蛋白染色剂时染色灵敏度高，可以达到ng水平，染色无须漂洗步骤，更节约时间；解决了现有技术需要漂洗、灵敏度低的缺陷并且本发明公开的金属铂配合物制备方法简单，稳定性高，细胞毒性较低。

技术领域

本发明属于生物分析技术领域，具体涉及一种环金属铂配合物及其制备方法与作为蛋白染色剂的应用。

背景技术

电泳作为一种重要的技术广泛应用于蛋白分析、药物开发等生物相关的领域中。利用电泳手段可以将蛋白质依据分子量的不同在十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶板（SDS-PAGE）上分离出不同的条带。这些蛋白条带的可视化是进行后续蛋白质分析的前提和基础。

蛋白可视化方法目前包括比色法和荧光法两种。比色法所用的染料有硝酸银和考马斯亮蓝等，但是硝酸银与蛋白染色是通过不可逆的化学键结合，不利于后续的蛋白质的分析，同时银染法不易控制染色条件，对技术人员的操作水平要求较高；考马斯亮蓝的灵敏度较差。荧光法所用的染料包括小分子和金属配合物两大类，其中金属配合物发光染料以其稳定性较高，发光效率较高等优点在蛋白染色剂市场中占据重要地位；但是现有金属配合物稳定性较差，细胞毒性较大，染色灵敏度偏低，大约在几百纳克，而且需要复杂的漂洗步骤。

发明内容

本发明的目的在于提供一类新型的蛋白染色剂，具体为环金属铂配合物及其制备方法与作为蛋白染色剂的应用；所用的配合物所用的配体为双齿配体，配合物属于电中性结构，制备方法更简单，稳定性更好，且毒性较小。

为达到上述发明目的，本发明采用的技术方案是：一种环金属铂配合物，中心金属原子为铂，为电中性配合物；具体的，其化学结构式如下：

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本发明还公开了上述环金属铂配合物在蛋白染色中的应用。

本发明的环金属铂配合物作为蛋白染色剂用在凝胶电泳技术中的蛋白染色过程；本发明的环金属铂配合物用于蛋白染色时，环金属铂配合物的浓度为0.01微摩尔到10毫摩尔之间，最优的是10微摩尔；环金属铂配合物与蛋白的共孵育时间为3-48小时，最优的是24小时；优选借助于有机溶剂的助溶，如二甲基亚砜（DMSO）、N,N’-二甲基甲酰胺、甲醇等；并且本发明的环金属铂配合物用于蛋白染色时，蛋白染色剂在染色过程中无需脱洗，直接将胶取出置于凝胶成像系统中成像，灵敏度非常高。

本发明还公开了上述环金属铂配合物的制备方法，包括以下步骤，以铂酸盐比如四氯铂酸钾与C^N二齿配体为原料制备中间产物，然后进一步与O^O二齿配体化合物反应制备环金属铂配合物。

上述技术方案中，以四氯铂酸钾与C^N二齿配体为原料，在乙二醇乙醚溶剂中反应24小时后，得到中间产物，然后进一步与O^O二齿配体化合物反应制备环金属铂配合物。

本发明还公开了一种蛋白染色用溶液，包括环金属铂配合物以及溶剂；所述环金属铂配合物的化学结构如下：

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本发明进一步公开了一种蛋白染色用溶液的制备方法，将环金属铂配合物溶入溶剂得到所述蛋白染色用溶液；所述环金属铂配合物的化学结构如下：

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