[发明专利]一种快速检测Q烟粉虱体内共生菌Cardinium的引物及方法有效
| 申请号： | 201710557630.2 | 申请日： | 2017-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN107254536B | 公开（公告）日： | 2020-12-08 |
| 发明（设计）人： | 褚栋;李洪冉;魏晓莹;张伟;郝兆国;陶云荔 | 申请（专利权）人： | 青岛农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12N15/11;C12Q1/04;C12R1/01 |
| 代理公司： | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 266109 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 快速 检测 烟粉虱 体内 共生 cardinium 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速检测烟粉虱体内
（1）提取Q烟粉虱基因组DNA，制得基因组DNA 溶液；
（2）以步骤（1）制得的基因组DNA为模板，利用引物对基因组DNA进行PCR扩增，制得PCR扩增产物；
所述引物为一对，上游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；
（3）对步骤（2）制得的PCR 扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳分析，使用2%琼脂糖凝胶电泳结束后在紫外凝胶成像仪上成像，当PCR扩增产物电泳图谱显示被测样品有147bp的一条条带时，则该被检测样品为
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增的扩增体系为：
基因组DNA溶液2 μL，10 μM引物0.26μL，5U/μL Taq酶0.13 μL，10× Taq Buffer 1.3μL，10 mM dNTP 0.26 μL，ddH2O补至13μL。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中PCR扩增的扩增条件如下：
94℃预变性3分钟；94℃变性30秒，64℃退火30秒，72℃延伸30秒，进行35个循环；72℃延伸3分钟。
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