[发明专利]一种基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针，其特征在于，所述探针的结构式为：

2.一种如权利要求1所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

(1)称取(5-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-乙酸和氯化亚砜，先将(5-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-乙酸溶于甲醇溶液中，冷却至0-4℃，然后逐渐滴加氯化亚砜的甲醇溶液，室温搅拌4小时，之后回流反应，反应时间3小时，将所得混合物真空蒸发，残余物加入饱和NaHCO₃溶液，随后用乙酸乙酯萃取，将有机层用无水Na₂SO₄干燥，真空蒸发溶剂，得到白色固体，反应过程如下，

(2)称取步骤(1)制备的白色固体和乙二胺，将两者溶解在甲醇溶液中，通氮气回流，混合搅拌3小时，产物冷却至室温、过滤、固体相用冷的CH₃OH洗涤，然后真空干燥得到产物，反应过程如下，

(3)称取6-羧基-2,3,3-三甲基-1-辛基-3H-吲哚盐与非对称吲哚方酸，将两者在甲苯与正丁醇体积比为1:1条件下过夜回流，得到产物，经柱层析分离得到蓝色产物，反应过程如下，

(4)称取等摩尔量的步骤(2)制得的产物和步骤(3)制得的蓝色产物，将步骤(3)制得的蓝色产物用二甲基甲酰胺溶解于反应容器中，随后依次加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺、1-羟基苯并三唑、N，N-二异丙基乙胺，室温搅拌1小时，将步骤(2)制得的产物加入到反应容器中，室温搅拌反应6-15小时，反应结束后，取出产物，旋蒸得到的蓝色固体，将二氯甲烷和甲醇以任意体积比混合，以其为洗脱剂，利用柱层析进行分离提纯，制得基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针，反应过程如下，

3.如权利要求2所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的制备方法，其特征在于，步骤(1)中(5-甲基-2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-乙酸和氯化亚砜的摩尔比为1～2:2～3。

4.如权利要求2所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的制备方法，其特征在于，步骤(2)中白色固体和乙二胺的摩尔比为0.1～1:5～10。

5.如权利要求2所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的制备方法，其特征在于，步骤(3)中6-羧基-2,3,3-三甲基-1-辛基-3H-吲哚盐与非对称吲哚方酸的摩尔比为0.5～1.5:0.5～1.5。

6.如权利要求2所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的制备方法，其特征在于，步骤(4)中室温搅拌反应时间为12小时。

7.一种如权利要求1所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的用途，其特征在于，所述探针用于识别Fe²⁺，具体操作步骤包括：

以二甲基亚砜为溶剂，把染料探针配制成浓度为10mM的染料探针溶液，在96孔板中依次加入2uL浓度为10mM的Fe²⁺溶液和2uL染料探针溶液，再加入196uL十二烷基磺酸钠溶液、丙酮水溶液、去离子水、乙酸水溶液或缓血酸铵-盐酸缓冲溶液，使每孔总体积为200uL，溶液由蓝色变成了橙黄色。

8.如权利要求7所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的用途，其特征在于，所述的乙酸水溶液为乙酸和水体积比为4:6的乙酸水溶液。

9.一种如权利要求1所述的基于胸腺嘧啶的近红外方酸菁染料探针的用途，其特征在于，所述探针用于识别Co²⁺,具体操作步骤包括：

以二甲基亚砜为溶剂，把染料探针配制成浓度为10mM的染料探针溶液，在96孔板中依次加入2uL浓度为10mM的Zn²⁺溶液和2uL染料探针溶液，再加入196uL乙醇、十二烷基磺酸钠溶液、丙酮水溶液、去离子水、乙酸水溶液或缓血酸铵-盐酸缓冲溶液，使每孔总体积为200uL，溶液由蓝色变成了无色。