[发明专利]利用光照培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法

权利要求书

1.利用光照培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法，其特征在于包括如下步骤：

A、种子液的制备

将活化好的平滑菱形藻置于无菌种子培养基中异养培养3-9天制成种子液，使平滑菱形藻细胞处于对数生长期；

B、发酵培养

将步骤A中的种子液按照体积比为3％-20％的接种量转接入无菌发酵培养基中，在光照条件下通气培养制备发酵液，培养基装量为20％-80％，培养温度20℃-30℃，培养周期4-12天；

所述的种子培养基及发酵培养基包括如下含量范围的原料：

NaCl 10g/L-32g/L；Na₂SiO₃·9H₂O 30mg/L-700mg/L；MgSO₄·7H₂O 1.09g/L-2.18g/L；CaCl₂·2H₂O 0.1g/L-0.27g/L；KH₂PO₄ 0.031g/L-0.062g/L；K₂HPO₄0.00375g/L-0.0075g/L；FeCl₃·6H₂O 0.291mg/L-0.582mg/L；MnCl₂·4H₂O 0.025mg/L-0.246mg/L；ZnCl₂ 0.031mg/L-0.311mg/L；CoCl₂·6H₂O 0.0114mg/L-0.0228mg/L；Na₂MoO₄·2H₂O 0.012mg/L-0.024mg/L；H₃BO₃ 3.06g/L-30.56g/L；(NH₄)₆MO₇O₂₄·4H₂O 0.028mg/L-0.278mg/L；Tris-buffer0.089g/L-0.892g/L；H₂SO₄ 1.64μg/L-16.4μg/L；vitamin B₁₂ 1.5g/L-15×10^-5g/L；biotin2.5g/L-25×10^-5g/L；氮源0.2g/L-7g/L；pH＝6-9，所述的种子培养基及发酵培养基中还包括如下含量范围的原料：葡萄糖5-40g/L；所述氮源选用有机氮源、无机氮源或其组合，其中有机氮源包括但不限于：酵母膏、蛋白胨、酵母提取物、氨基酸、尿素、蛋白水解物或其组合，无机氮源包括但不限于选用硝酸钾、硝酸钠、氯化铵、碳酸氢铵或其组合；

所述的光照强度为不超过200μmol·m^-2·s^-1；

所述的平滑菱形藻选自平滑菱形藻(Nitzschia laevis)UTEX 2047、平滑菱形藻(Nitzschia laevis)CCMP559、或平滑菱形藻(Nitzschia laevis)CCMP 1092；

C、从步骤B发酵结束后的发酵液中提取岩藻黄素。

2.根据权利要求1所述的利用光照培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法，其特征在于所述的步骤B中的发酵培养基置于生物反应器内，生物反应器选用三角瓶或柱式光生物反应器。

3.根据权利要求1所述的利用光照培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法，其特征在于光照所用的光源包括但不局限于太阳光、荧光灯灯光、LED灯灯光或其组合。

4.根据权利要求2所述的利用光照培养平滑菱形藻生产岩藻黄素的方法，其特征在于采用三角瓶时将其置于光照摇床中震荡培养，摇床转速为100转/分钟-240转/分钟；采用柱式光生物反应器时通入无菌空气培养，通气量为1-3升/分钟。