[发明专利]一株产γ-癸内酯的滴孔菌及其应用

权利要求书

1.一株产γ-癸内酯的滴孔菌，其特征在于：该菌株名为滴孔菌(Piptoporus sp.)A-9，菌株已于2017年5月25日保藏在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，保藏号为CGMCC No.13895。

2.权利要求1所述产γ-癸内酯的滴孔菌在制备γ-癸内酯中的应用，步骤顺序如下：

(1)菌种选择：选用滴孔菌(Piptoporus sp.)A-9CGMCC No.13895；

(2)斜面培养活化：将菌种接种于斜面培养基，27～33℃条件下，静止培养96～102小时，备用；其中，所述斜面培养基组成为：马铃薯180～220g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，酵母膏2g，去离子水1L；pH自然；固体培养基加15g/L琼脂粉，即PDA；

(3)种子培养：将步骤(2)培养的菌株，在无菌条件下用接种环接1～2环于90～100mL液体种子培养基中，置旋转转速为160～180转/分钟、旋转半径为40mm的摇床上，27～33℃培养72～96小时，得种子液；其中，所述液体种子培养基的组成是：马铃薯180～220g，葡萄糖20g，蛋白胨2g，酵母膏2g，去离子水1L；pH自然；

(4)以γ-癸内酯为目的产物发酵培养；

其特征在于：

步骤(4)所述以γ-癸内酯为目的产物发酵培养是摇瓶发酵或发酵罐发酵，其中：

摇瓶发酵：以8～10％的体积比的接种量，将种子液接种于装有80～100mL发酵培养基的摇瓶中，27～33℃，转速为150～180转/分钟，pH为5.0±0.5，摇瓶发酵144～168小时，即获得含γ-癸内酯的发酵产物；

5L发酵罐发酵：以8～10％的体积比的接种量，将种子液接种于罐装有3.3～3.5L发酵培养基的5L发酵罐中，27～33℃进行通风搅拌培养，其中搅拌转速为200～300r/min，通气量8L/min，罐内压力1.0±0.02MPa，发酵时间为144～168小时，发酵液初始pH值为5.0～6.0，发酵过程中定时取样测定发酵液中的菌体干重和γ-癸内酯的浓度，当发酵液中γ-癸内酯浓度不再上升时，结束发酵，即获得含γ-癸内酯的发酵产物；

上述以γ-癸内酯为目的产物发酵培养基的组成是：可溶性淀粉10～40g/L，豆粕粉10～40g/L，蓖麻油100g，吐温-20体积比0.05％，七水合硫酸镁0.5g/L，磷酸二氢钾0.46g/L，十二水合磷酸氢二钠1.2g/L；去离子水1L；pH5±0.5。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，步骤(4)所述发酵培养基初始可溶性淀粉浓度为20g/L～30g/L。