[发明专利]检测人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法

说明书

本发明涉及检测人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法。所述试纸通过双抗体夹心法检测人ST2蛋白，所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一ST2单克隆抗体作为捕获抗体，所述第一ST2单克隆抗体来源于序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所述的序列中的一者；并且所述双抗体夹心法采用第二ST2单克隆抗体作为检测抗体，所述第二ST2单克隆抗体来源于序列表SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所述的序列中的另一者。本发明的荧光免疫层析试纸操作简便、快速、检测范围宽、特异性高、灵敏度好。

技术领域

本发明属于多肽化学和免疫学领域，具体涉及人可溶性生长刺激表达基因2蛋白(ST2)抗原表位肽、用该抗原表位肽制备的ST2特异性抗原和相应的单克隆抗体或多克隆抗体、所述抗体在制备人ST2体外诊断试剂盒上的应用，人ST2体外诊断试剂盒，以及一种用于定量检测待测物中人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法。

背景技术

1989年，可溶性生长刺激表达基因2蛋白(ST2)作为白介素I受体家族成员之一被发现，之后被证实其参与多种病理生理过程，在炎性和变态反应性疾病中发挥重要作用。但因当时未发现其功能性配体，故长期以来ST2一直被认为是一个孤儿受体，于是针对ST2的研究又有了新的进展。ST2是一种心肌蛋白，直接影响心脏疾病进展的ST2蛋白有两种，可溶性ST2和跨膜形式的STL2。这两种ST2蛋白直接与心脏疾病的进展相关：当可溶性ST2浓度低时，ST2的配体白介素33(IL-33)可与ST2L结合，这对心脏有保护作用。当可溶性ST2水平高时，可溶性ST2可竞争性的与IL-33结合，使IL-33与ST2L结合减少，从而使IL-33无法进入心脏保护的信号转导途径。因此，心脏持续承受压力，导致细胞死亡和组织纤维化，降低了心脏的功能，增加疾病的进展率。机械应力诱导心肌细胞产生血清可溶性ST2后，其阻断了白介素33(IL-33)抗心肌肥大和抗心肌纤维化的作用，是心肌细胞肥厚和纤维化的标志物，且不受年龄、肾功能损害和体重指数的影响。可溶性ST2为一种心肌纤维化的标志物，不但可以预测急性心肌梗死和心力衰竭患者的预后，还可以预测心衰患者的入院和死亡机率，而且还可以在利纳指标之上提供预后信息，其被认为在心力衰竭和其他心血管疾病中具有很高的应用价值。

ST2作为生物标志物已经反复被证实具有潜在的价值，测量急性呼吸困难或心肌梗死的急诊患者血清中ST2水平可能为分层护理提供一些有用的预后信息。ST2具有能早期监测出风险、浓度反应即时、数据容易解读等优点，并已获得许可专业认可。ST2诊断可用于发病前筛查，治疗前的指导和参考，治疗中和治疗后的监控及观察。

检测血清中的ST2水平的最理想的方法为免疫检测，利用ST2抗体和先进的酶免疫、化学发光技术，通过常规抽血即可检查ST2水平。因此，寻找合适的具有免疫原性的ST2抗原表位肽、制备特异性的ST2抗原及抗体即成了重点。

荧光免疫层析方法测血液中的待测物操作简便、快速，只需10分钟就能完成样品检测，并且检测范围宽，灵敏度好，能够迅速及时地帮助诊断病情，监测预后。中国专利申请No.200910117820.8公开了一种荧光微球免疫层析试纸条的制备方法及定量检测方法；中国专利申请No.200910047352.1公开了一种荧光免疫层析试纸及其制备方法和应用。然而，目前还没有针对人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种用于定量检测待测物中人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸及其制备方法。

具体而言，本发明提供了：

一种用于定量检测待测物中人ST2蛋白的荧光免疫层析试纸，该试纸通过双抗体夹心法检测所述人ST2蛋白，其中：

所述双抗体夹心法采用标记有荧光微球的第一ST2单克隆抗体作为捕获抗体，所述第一ST2单克隆抗体来源于人ST2抗原表位肽(1)和(2)中的一者；并且