[发明专利]一种基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器、制备方法及其应用有效
申请号: | 201710343854.3 | 申请日: | 2017-05-16 |
公开(公告)号: | CN107144603B | 公开(公告)日: | 2019-10-01 |
发明(设计)人: | 王广凤;杨新胜 | 申请(专利权)人: | 安徽师范大学 |
主分类号: | C12Q1/48 | 分类号: | C12Q1/48;G01N27/02;G01N27/327 |
代理公司: | 芜湖安汇知识产权代理有限公司 34107 | 代理人: | 任晨晨 |
地址: | 241000 安徽省*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 静电 作用 阻抗 电化学 生物 传感器 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
1)将抛光处理后的金电极浸入SH-DNA的缓冲溶液中,培养,然后取出,清洗,得到修饰了SH-DNA的金电极;
2)将步骤1)得到的修饰了SH-DNA的金电极浸入含有赖氨酸的多肽的缓冲溶液,培养,得到静电作用的阻抗型电化学生物传感器;
步骤1)中所述SH-DNA序列为:SH-ACTATGTTCCTTTTCCACCACCAA。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤1)中所述培养是指:在室温下培养10h。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中所述含有赖氨酸的多肽为:RGKGGKGLGKGGAKA,K为赖氨酸。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤2)中所述培养是指:在37℃下培养1h。
5.一种基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器,其特征在于,采用权利要求1-4任一项所述的方法制备得到。
6.一种权利要求5所述的基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器检测组蛋白乙酰化酶的应用,其特征在于,检测方法为:
将上述制备得到的基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器浸入含有组蛋白乙酰化酶和组蛋白乙酰化辅酶的缓冲溶液中,培养,清洗,检测所得电极的电化学阻抗,构建电极的电化学阻抗与组蛋白乙酰化酶的线性关系,实现对其检测。
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,检测组蛋白乙酰化酶时,组蛋白乙酰化酶的浓度分别为:0,0.1,0.2,0.3,0.4,0.5,1,5,10,50,100nM;组蛋白乙酰化辅酶浓度均为1μM,所述培养条件为在37℃下培养1h。
8.一种权利要求5所述的基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器检测组蛋白去乙酰化酶的应用,其特征在于,检测方法为:将基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器浸入含有组蛋白乙酰化酶和组蛋白乙酰化辅酶的缓冲溶液中,培养,然后,得到的电极浸入组蛋白去乙酰化酶和1β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物NAD+中,培养,清洗,测电化学阻抗;构建电极的电化学阻抗与组蛋白去乙酰化酶的线性关系,实现对其检测。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,检测组蛋白去乙酰化酶的具体检测方法为:
将制备得到的基于静电作用的阻抗型电化学生物传感器浸入含100nM有组蛋白乙酰化酶和1μM组蛋白乙酰化辅酶的缓冲溶液中,37℃下培养1h,然后,得到的电极分别浸入含有0,1,2,4,6,8,10,50,100,200,400nM的组蛋白去乙酰化酶和1μM的β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸水合物NAD+中,37℃下培养1h,清洗,测电化学阻抗;构建电极的电化学阻抗与组蛋白去乙酰化酶的线性关系,实现对其检测。
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