[发明专利]人工创制玉米雄性不育系与高效的转育方法

权利要求书

1.一种培育玉米雄性不育系的方法，包括如下步骤：利用CRISPR/Cas9系统对受体玉米基因组中的育性基因进行编辑，进而使所述育性基因功能丧失，得到玉米雄性不育系；

所述育性基因为编码MS26蛋白的基因；

所述CRISPR/Cas9系统中包括两个sgRNA，分别命名为sgRNA1和sgRNA2；

所述sgRNA1识别的靶序列为序列4所示的DNA分子；

所述sgRNA2识别的靶序列为序列5所示的DNA分子；

所述编辑的方法为将向所述受体玉米中导入玉米基因组编辑的载体；

所述玉米基因组编辑的载体含有所述sgRNA1的编码基因、所述sgRNA2的编码基因、RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子、Cas9蛋白表达盒和筛选标记基因；

所述sgRNA1的编码基因是序列7第7245-7347位所示的DNA分子；

所述sgRNA2的编码基因是序列7第6692-6794位所示的DNA分子；

用于启动所述sgRNA1的编码基因转录的RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子为启动子ZmU6-2；

用于启动所述sgRNA2的编码基因转录的RNA聚合酶Ⅲ识别的启动子为启动子ZmU6-6；

所述启动子ZmU6-2是下述b1)所示的DNA分子：b1)序列2所示的DNA分子；

所述启动子ZmU6-6是下述c1)所示的DNA分子：c1)序列3所示的DNA分子。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：所述玉米基因组编辑的载体的核苷酸序列为序列7。

3.一种培育玉米雄性不育系品种的方法，包括如下步骤：(1)按照权利要求1-2中任一所述方法获得玉米雄性不育系；

(2)以受体玉米为轮回亲本，对所述玉米雄性不育系进行回交转育，得到玉米雄性不育系品种。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：

1)以所述玉米雄性不育系为母本，以受体玉米为父本进行杂交，得到F1代；

2)从所述F1代中选取具有雄性不育表型的植株为母本，以所述受体玉米为父本进行杂交，得到BC1代；

3)从所述BC1代中选取具有雄性不育表型的植株为母本，以所述受体玉米为父本进行杂交，得到BC2代；

4)用检测权利要求1中所述筛选标记基因的物质对所述BC2代植株个体进行检测，从所述BC2代中选取没有所述筛选标记基因的植株进行自交，得到自交后代；从所述自交后代中选取具有雄性不育表型的植株个体，即为玉米雄性不育系品种。